项目氯化钠注射液无菌检查法VIP专享VIP免费

重庆医药高等专科学校项目9氯化钠注射液的无菌检查法无菌检查法的定义:无菌检查法是指用于检查《药典》要求无菌的药品、医疗器具、原料、辅料及其他品种是否无菌的一种方法。符合规定的意义:仅表明了供试品在该检验条件下未发现被微生物污染。（一）实训目的（二）原理及应用（三）仪器与试剂（四）操作步骤（五）实训报告（六）注意事项（七）思考与讨论（一）实训目的1．掌握注射剂（薄膜过滤法）的操作方法。2．熟悉无菌检查（薄膜过滤法）的原理。1.试验原理：无菌检查法是利用无菌操作的方法，将被检查的药品分别加入适合需氧菌、厌氧菌和真菌生长的液体培养基中，置于适宜温度下培养一定时间后，观察有无微生物生长，以判断药品是否合格。（二）原理及应用2.操作流程及方法：培养基的制备、培养基的适用性检查、稀释液和冲洗液的制备、方法验证试验、取样、供试品无菌检查。供试品无菌检查的方法有薄膜过滤法和直接接种法两种。只要供试品性状允许，应优先采用封闭式薄膜过滤法，也可用一般薄膜过滤器。哪些药物需要进行无菌检查？思考：常见的无菌制剂（检验品种）包括哪些?3.应用注射剂（水针、粉针、油乳注射剂）眼用及非注射产品（手术、烧伤、严重创伤面给药制剂）可吸收的止血剂无菌封装的原料药医疗器具和医用材料常见的无菌制剂（检验品种）：4.无菌检查的环境要求环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域一般要求温度：18～26℃湿度：45％～65％例行消毒处理洁净度检查1.菌种金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）〔CMCC(B)26003〕铜绿假单胞菌（Pseudomonasaeruginosa）〔CMCC(B)10104〕枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）〔CMCC（B）63501〕生孢梭菌（Clostridiumsporogenes）〔CMCC(B)64941〕白色念珠菌（Candidaalbicans）〔CMCC(F)98001〕黑曲霉（Aspergillusniger）〔CMCC(F)98003〕均为国家药品检定机构分发的标准菌种（三）仪器与试剂2.培养基一般采用商品脱水培养基、洁净玻璃器皿、纯水配制培养基的pH应符合规定分装好的培养基及时密封后必须在配制当天（2小时内最佳）进行灭菌处理培养基的储存:2～25℃、避光环境，可保存3周左右培养基装量符合规定要求培养基适应性检查（无菌性检查、灵敏度检查）需氧菌和厌氧菌培养基：硫乙醇酸盐流体培养基30～35℃（32℃左右）红色氧化层（h＜深度的1/5）100℃水浴加热10分钟以除去氧化层，加热时间不超过20分钟。真菌培养基：改良马丁培养基23～28℃（25℃左右）沸水浴加热10min灭菌后放置3天的培养基3.供试品氯化钠注射液（250ml）4.稀释液及冲洗液稀释液：0.1%蛋白胨水溶液（PH7.1）（如果蛋白胨溶液浑浊，应过滤）或pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液。冲洗液：聚山梨酯80-0.1%蛋白胨水溶液（非水溶液制剂供试品的冲洗）溶剂：十四烷酸异丙酯（膏剂和粘性油剂的溶剂，膜滤除菌）5.仪器及用具无菌室内常备器具恒温培养箱及生化培养箱离心机，显微镜，高压蒸汽灭菌器，恒温烤箱，开放或全封闭过滤系统等玻璃器皿无菌衣，裤，帽，口罩除菌滤器及滤膜薄膜过滤仪24/10/24171.培养基的适用性检查无菌性检查：每批培养基随机抽取不少于5支（瓶），培养14天，应无菌生长。灵敏度检查：用已知的标准菌种来检定培养基的敏感度，检定培养基敏感度的菌种是由国家药品检定机构分发的标准菌种。（四）操作步骤24/10/2418生孢梭菌菌液：接种至硫乙醇酸盐流体培养基；30～35℃培养18～24小时。白色念珠菌菌液：接种至改良马丁培养基或改良马丁琼脂培养基；23～28℃培养24～48小时。上述培养物用0.9%NaCl无菌溶液配制成每1ml含菌数小于100cfu的菌悬液。（1）菌液制备金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌菌液：接种至营养肉汤培养基或营养琼脂培养基；30～35℃培养18～24小时。培养基灵敏度检查方法：24/10/2419黑曲霉菌菌液：接种至改良马丁琼脂培养基上，23～28℃培养5～7天至产生大量孢子，加入3～5ml无菌的含0.05％（v/v）聚山梨酯80的0.9%氯化钠溶液，将孢子洗脱。然后，用适宜的方法吸出孢子悬液至无菌试管内，用无菌的含0.05％...