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琼脂糖凝胶电泳的制备及核酸检测

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实验一 分子生物实验室常用仪器设备简介及操作 (一)实验目的 1、认识仪器设备,熟悉操作 2、学会正确运用仪器设备,避免损坏贵重仪器。 (二)仪器设备简介及操作 1、分子生物实验室常用仪器:微量移液器、高速台式离心机 PCR 仪、凝胶成像系统、电泳仪、恒温气浴摇床、超净工作台 灭菌锅。 2、仪器设备的介绍 1) 微量移液器 微量移液器是连续可调的、计量和转移液体的专用仪器,其装有直接读数容量计。 微量移液器有多种规格,在移液器量程范围内能连续调节读数,主要量程有 0.1~0.25μ l;0.5~10μ l ;10~100μ l ;20~200μl ;100~1000μ l; 取液第一停点;放液第二停点;始终保持垂直; 一定要在允许量程范围内设定容量,千万不要将读数的调节超出其适用的刻度范围,否则会造成损坏;移液器使用完后,将刻度调到最大刻度,收藏。 2) 高速台式离心机 离心机的功能:分离,纯化 ① 把离心机放置于平面桌或平面台上,检查离心机是否放置平稳。 ② 离心管必须对称放置,且检查管道是否有玻璃碎片。 3) PCR 仪 PCR 仪,也称DNA 热循环仪、基因扩增仪,能使一对寡核苷酸引物结合到正负DNA 链上的靶序列两侧,从而酶促合成拷贝数为百万倍的靶序列DNA 片段,它的每一循环包括DNA 变性、复性、延伸三个反应。 操作:create——user name——accept——method——method name——accept——uilt——more——more——delete(method)——delete(user);总之,先设置user name,再是method name;而删除时,则相反。 4) 凝胶成像系统 在分析装置中放电泳样品——打开电脑,运行 Smart View 软件电泳仪——import——获取视频图像——ON 紫光灯——调最佳图像——拍摄——保存图像——OFF 紫光灯——退出软件界面。 注意:在图像获取过程中,若通过软件打开紫外/可见光,则必须再通过软件关闭,若通过紫外与可见分析装置上打开紫外/可见光,则从分析装置上关闭,严禁互用,导致紫外灯长亮。 5) 恒温气浴摇床 摇床(振荡器)广泛用于对温度和振荡频率有较高要求的细菌培养、发酵、杂交、生物化学反应以及酶和组织研究等。实验室常用的液体摇匀,微生物、细菌和细胞培养。 样品瓶牢固放入弹簧夹中——接通电源开关,设定参数(温度、时间、转速等)——启动——控制面板的电源键(显示屏显示消失)——关闭电源总开关。注:可在摇匀过程按“暂停键”暂停。 6) 超净工作台 超净工作...

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