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生理学实验设计

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生 理 实 验 设 计 实验课题:筒箭毒对神经-肌肉接头处的兴奋传递的影响 实验成员:星期五下午第四实验室第二组 筒箭毒对神经-肌肉接头处兴奋传递的影响 实验假设 筒箭毒能与乙酰胆碱竞争神经肌接头处的nm 受体,使肌肉松弛。 实验原理与目的 神经肌肉接头处的兴奋传递过程有三个重要的环节: 一是钙离子促进神经轴突中的囊泡膜与接头前膜发生融合而破裂; 二是囊泡中的乙酰胆碱释放到神经肌肉接头间隙; 三是乙酰胆碱与接头后膜上的受体结合,引发终板电位。 乙酰胆碱(Acetylcholine,ACh)是一种重要的神经递质,是连接每个运动神经元和骨骼肌之间的信使。如果 ACh 的传递受阻,肌肉就不能收缩。箭毒是美印第安人在猎箭头部涂抹的一种毒药,它能够占用并阻塞 ACh 受体的位置,能竞争性阻断 ACh 的去极化作用致使神经递质不能影响肌肉。能与ACh 竞争神经肌接头处的nm 胆碱能受体,但不激动受体,因而使骨骼肌松弛。抗胆碱酯酶药可拮抗其肌肉松弛作用,新斯的明是胆碱酯酶抑制剂,可通过抑制胆碱酯酶增减乙酰胆碱在肌接头间隙的浓度。故筒箭毒过量可用适量新斯的明解救。筒箭毒与乙酰胆碱竞争性结合乙酰胆碱受体,注射新斯的明后使突触间隙内的乙酰胆碱浓度升高而使竞争性增强,故乙酰胆碱与受体接触增多,从而使肌无力症状减弱。 本实验的目的是探索筒箭毒对神经--肌接头处兴奋传递的影响极其相关机制;观察筒箭毒的肌松作用,分析其作用点;了解新斯的明对抗筒箭毒的作用。 实验对象 大白鼠,体重 250g 以上 实验器材与药品 Powerlab 一套(主机,刺激器,张力换能器),手术器械一套,小动物人工呼吸机,气管插管,棉线,大头针,铁架台,注射器 0.001g%筒箭毒碱,0.005g%新斯的明,25%乌拉坦,1.5%普鲁卡因,生理盐水 实验方法 1. 大鼠称重,麻醉;25%乌拉坦腹腔注射 0.5ml/100g 麻醉。然后仰卧固定于鼠手术床上,分离气管及颈外静脉,分别插入气管插管和静脉插管,准备好人工呼吸机。数分钟后翻正反射消失,即可进行实验; 2. 分离坐骨神经;在髋关节后,坐骨结节内凹陷处切开皮肤,钝性分离肌肉,暴露一段坐骨神经,用浸有 1.5%普鲁卡因的棉线围绕坐骨神经打一个结,在坐骨神经干上做传导阻滞麻醉,排除下行干扰; 3. 分离腓神经;在外侧剪开皮肤,钝性分离肌肉组织,分离腓神经,神经穿线备用; 4. 分离胫前肌;将大鼠两前肢固定在手术台(仰卧),从后置踝关节正前方向剪开小腿皮肤,剪断踝...

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