双脱氧链终止法又称为Sanger法 原理是：核酸模板在DNA 聚合酶、引物、4 种单脱氧核苷三磷酸 ( d NTP，其中的一种用放射性 P32 标记 )存在条件下复制时，在四管反应系统中分别按比例引入 4 种双脱氧核苷三磷酸 ( dd NTP )，因为双脱氧核苷没有 3’-O H，所以只要双脱氧核苷掺入链的末端，该链就停止延长，若链端掺入单脱氧核苷，链就可以继续延长
如此每管反应体系中便合成以各自 的双脱氧碱基为3’端的一系列长度不等的核酸片段
反应终止后，分 4 个泳道进行凝胶电泳，分离长短不一的核酸片段，长度相邻的片段相差一个碱基
经过放射自显影后，根据片段 3’端的双脱氧核苷，便可依次阅读合成片段的碱基排列顺序
Sanger 法因操作简便，得到广泛的应用
后来在此基础上发展出多种 DNA 测序技术，其中最重要的是荧光自动测序技术
荧光自动测序技术 荧光自动测序技术基于 Sanger 原理，用荧光标记代替同位素标记，并用成像系统自动检测，从而大大提高了 D NA 测序的速度和准确性
20 世纪 80 年代初 Jorgenson 和 Lu kacs 提出了毛细管电泳技术( c a p il l ar y el ect r ophor es i s )
1992 年美国的 Mathies实验室首先提出阵列毛细管电泳 ( c a p il l ar y ar r a y el ectr ophor es i s ) 新方法，并采用激光聚焦荧光扫描检测装置，25 只毛细管并列电泳，每只毛细管在1
5h内可读出 350 bp，DNA 序列,分析效率可达 6 000 bp/h
1995 年 Woolley 研究组用该技术进行测序研究，使用四色荧光标记法，每个毛细管长 3
5cM，在9min 内可读取 150 个碱基，准确率约 97 %
目前, 应用最广泛的应用生物系统公司 (
