抗 体 的 提 取 与 纯 化 精 制 免 疫 球 蛋 白 的 方 法 很 多
一 般 采 用 综 合 技 术 ， 避 免 蛋 白 变 性
如 分 离 IgG 时 ， 多结 合 使 用 盐 析 法 与 离 子 交 换 法 ， 以 求 纯 化
提 取 IgM 的 方 法 也 很 多 ， 如 应 用 凝 胶 过 滤 与 制备 电 泳 法 ， 或 离 子 交 换 与 凝 胶 过 滤 等
一 、盐析法 1
取 x ml 血 清 加 x ml 生 理 盐 水 ， 于 搅 拌 下 逐 滴 加 入 2x ml 饱 和 硫 酸 铵 ， 硫 酸 铵 的 终 饱和 度 为 50%
4℃ ， 3h 以 上 ， 使 其 充 分 沉 淀
离 心 （ 3000rpm） ,20min,充 上 清 ， 以 x ml 生 理 盐 水 溶 解 沉 淀 ， 再 逐 滴 加 饱 和 硫 酸 铵x /2ml
置 4℃ 3h 以 上 （ 此 时 硫 酸 铵 的 饱 和 度 为 33%）
重 复 上 述 第 二 步 过 程 1～ 2 次
末 次 离 心 后 所 得 沉 淀 物 为 γ-球 蛋 白 ， 以 pH7
4 PBS 溶解 至 x ml 装 入 透 析 袋
对 PBS 充 分 透 析 、 换 液 3 次 ， 至 萘 氏 试 剂 测 透 析 外 液 无 黄 色 ， 即 无 NH4+为 止
取 透 析 袋 内 样 品 少 许 作适当倍数稀释后 ， 以 751 型紫外 分 光光度 计测 定蛋 白 含量
影响盐 析 的 因素很 多 ， 如 蛋 白 质的 浓度 ， 盐 的 浓度 ， 饱 和 度 和 pH， 温度 等 都可影响盐析 的 结 果， 操作时 要充 分 注意
（ 1） 蛋 白 质的 浓度 盐 析 时 ， 溶 液 中蛋 白 质的 浓度 对 沉 淀 有双重 影
