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免疫血清的制备

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免疫血清的制备 免疫血清的制备是一项常用的免疫学实验技术。高效价、高特异性的免疫血清可作为免疫学诊断的试剂(如用于制备免疫标记抗体等),也可供特异性免疫治疗用。免疫血清的效价高低取决于实验动物的免疫反应性及抗原的免疫原性。如以免疫原性强的抗原刺激高应答性的机体,常可获得高效价的免疫血清。… 免疫血清的制备是常用的免疫学实验技术。高效价、高特异性的免疫血清可作为免疫学诊断的试剂(如用于制备免疫标记抗体等),也可供特异性免疫治疗用。免疫血清的效价高低取决于实验动物的免疫反应性及抗原的免疫原性。如以免疫原性强的抗原刺激高应答性的机体,常可获得高效价的免疫血清。而使用免疫原性弱的抗原免疫时,则需同时加用佐剂以增强抗原的免疫原性。免疫血清的特异性主要取决于免疫用抗原的纯度。因此,如欲获得高特异性的免疫血清,必须予先纯化抗原。此外,抗原的剂量、免疫途径及注射抗原的时间间隔等,也是影响免疫血清效价的重要因素应予重视。 一、原理 具有免疫原性的抗原可刺激机体相应B 细胞增殖、分化形成浆细胞并分泌特异性抗体。由于抗原分子表面的不同决定 簇 为 不 同 特 异 性 的 B 细 胞 克 隆 所 识 别 , 因 此 由 某 一 抗 原 刺激 机 体 后 产 生 的 抗 体 , 实 际 上 为 针 对 该 抗 原 分 子 表 面 不 同 决定 簇 的 抗 体 混 合 物 (即 多 克 隆 抗 体 )。 另 外 , 抗 体 的 产 生 具 有回 忆 应 答 的 规 律 性 , 牨 m 现 为 初 次 免 疫 注 射 与 再 次 免 疫 注 射后 的 抗 体 应 答 特 点 截 然 不 同 。 是 由 于 记 忆 性 B 细 胞 参 与 再 次应 答 所 致 。 二 、 免 疫 方 法 根 据 抗 原 的 性 质 不 同 而 异 。 下 面 以 制 备 家 兔 抗 人 IgG 免疫 血 清 为 例 作 具 体 说 明 。 1. 用 剪 刀 剪 去 家 兔 两 后 脚 掌 的 部 分 兔 毛 , 以 酒 精 及 碘酒 消 毒 皮 肤 ; 2. 第 一 次 免 疫 : 用 2ml 注 射 器 吸 取 弗 氏 完 全 佐 剂 (FCA)乳 化 的 抗 原 (人IgG)下 称FCA-IgG)液1ml, 每侧脚 掌 皮 下 各注 入0.5ml。 3. 第 二 次 免 疫 : 间隔10-14 天后 , 于 两 侧 窝及 鼠蹊部 肿大的 淋巴结内注 入FCA-Ig...

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