精品文档---下载后可任意编辑A 亚群禽白血病病毒 gp85 囊膜蛋白原核表达及初步应用中期报告该讨论旨在通过原核表达系统获得 A 亚群禽白血病病毒(gp85)囊膜蛋白，并对其进行初步应用。以 GP85 基因为模板，采纳 RT-PCR 方法扩增得到目的基因片段。将目的基因片段插入到 pET-28a 载体上，在 E. coli Rosetta(DE3) 中进行原核表达。利用 Ni2+亲和层析法纯化获得表达的融合蛋白，并通过 Western blot 检测其免疫原性。结果显示融合蛋白 GP85-His 可在突变菌株中进行表达，分子量约为 85 kDa，纯化后得到了较高的纯度。Western blot 分析表明，该融合蛋白能够被抗 GP85蛋白抗体识别，证明其具有免疫原性。初步应用中，我们将纯化的融合蛋白用于免疫反应，结果显示该融合蛋白能够诱导禽体产生较高水平的特异性抗体。另外，我们将融合蛋白用于酶联免疫吸附实验（ELISA）检测禽体血清中 GP85 特异性抗体的含量，结果发现该方法具有很好的特异性和敏感性。综上所述，我们成功地构建了一个原核表达的 A 亚群禽白血病病毒gp85 囊膜蛋白表达系统，并初步证明了其在免疫学讨论中的应用潜力。未来，我们将进一步优化表达条件并探究该融合蛋白在疫苗研发中的应用前景。
