精品文档---下载后可任意编辑BPI 基因对断奶仔猪 F18 大肠杆菌抗性的功能分析的开题报告摘要：F18 大肠杆菌是一种常见的猪肠道致病菌，其感染可导致仔猪腹泻和生长延迟等问题，给猪肉业生产带来较大的经济损失。BPI 基因编码的内毒素结合蛋白可以识别并结合细菌内毒素，参加免疫防备反应。本讨论拟使用 F18 大肠杆菌诱导产生 F18 耐药性的仔猪进行 BPI 基因功能分析，探究 BPI 基因对仔猪 F18 大肠杆菌抗性的影响机制，为讨论仔猪肠道免疫防备提供理论依据。关键词：F18 大肠杆菌；BPI 基因；仔猪；抗性；机制一、讨论背景F18 大肠杆菌是一种猪肠道致病菌，能够感染仔猪肠道，导致腹泻、生长延迟等症状，严重影响了猪肉业的生产效益。因此，寻找有效的控制方法对农业生产和经济具有重要意义。BPI（bactericidal permeability-increasing protein）基因编码的内毒素结合蛋白可识别并结合细菌内毒素，参加免疫防备反应。该蛋白的缺失或突变与人和动物的感染性疾病、免疫缺陷等相关。因此，BPI 基因在讨论动物肠道免疫防备中的功能具有一定的理论意义和应用前景。二、讨论目的本讨论旨在探究 BPI 基因对仔猪 F18 大肠杆菌抗性的影响机制，为讨论仔猪肠道免疫防备提供理论依据。三、讨论内容和方法1.讨论内容（1）F18 大肠杆菌的分离、鉴定及耐药性诱导；（2）BPI 基因的克隆和构建表达载体；（3）BPI 基因转染仔猪肠道细胞系；（4）F18 大肠杆菌对 BPI 基因转染仔猪肠道细胞的侵染；（5）检测 BPI 基因对仔猪 F18 大肠杆菌抗性的影响机制。2.讨论方法精品文档---下载后可任意编辑（1）F18 大肠杆菌的分离、鉴定及耐药性诱导：采纳标准细菌学方法分离、鉴定 F18 大肠杆菌，并使用青霉素、两性霉素 B 等药物诱导其耐药性；（2）BPI 基因的克隆和构建表达载体：利用 RT-PCR 方法得到 BPI基因的全长序列，构建含有 BPI 基因的表达载体；（3）BPI 基因转染仔猪肠道细胞系：将 BPI 基因表达载体转染到仔猪肠道细胞系中；（4）F18 大肠杆菌对 BPI 基因转染仔猪肠道细胞的侵染：将耐药的F18 大肠杆菌感染 BPI 基因转染的仔猪肠道细胞，并观察其侵染能力；（5）检测 BPI 基因对仔猪 F18 大肠杆菌抗性的影响机制：通过ELISA 和 PCR 等方法检测 BPI 基因对仔猪 F18 大肠杆菌抗性的影响机制。四、讨论意义与预期结果本讨论旨在探究 BPI 基因对仔猪 F18 大肠杆菌抗性的影响机制，为讨论仔猪...
