原代细胞培养实验报告

实 验 ： 细 胞 培 养 1.实 验 目 的 初 步 掌 握 哺 乳 动 物 细 胞 的 原 代 培 养 与 传 代 培 养 的 基 本 操 作 过 程 ，为 生 物 工 程在 医 学 上 的 应 用 打 下 基 础 。 2.实 验 原 理 从 生 物 体 中 取 出 某 种 组 织 或 细 胞 ， 模 拟 体 内 生 理 条 件 ， 在 人 工 培 养 条 件 下 使其 生 存 、 生 长 、 繁 殖 或 传 代 ， 这 一 过 程 称 为 细 胞 培 养 。 细 胞 培 养 技 术 的 最 大 优 点是 使 我 们 得 以 直 接 观 察 活 细 胞 ， 并 在 有 控 制 的 环 境 条 件 下 进 行 实 验 ， 避 免 了 体 内实 验 时 的 许 多 复 杂 因 素 ， 还 可 以 与 体 内 实 验 互 为 补 充 ， 可 同 时 提 供 大 量 生 物 性 状相 同 的 细 胞 作 为 研 究 对 象 ， 耗 费 少 ，比 较 经 济 ，因 此 成 为 生 物 学 研 究 的 重 要手段。近年来， 在 体 细 胞 遗传 、 分化、 胚胎发生 、 肿瘤发生 、 免 疫学 、 细 胞 工 程 、 放射生 物 学 以 及老年学 等一 系列的 研 究 领域中 得 到广泛的 应 用 ， 并 取 得 了 丰硕的 成 果。 细 胞 培 养 可 分为 原 代 培 养 和传 代 (继代 )培 养 。直 接 从 体 内 获取 的 组 织 细 胞 进行 首次培 养 为 原 代 培 养 ；当原 代 培 养 的 细 胞 增殖 达到一 定密度后， 则需要做再培养 ， 即将培 养 的 细 胞 分散后， 从 一 个容器以1： 2 或 其 他比 率转移到另一 个或 几个容器中 扩大 培 养 ， 为 传 代 培 养 ， 传 代 培 养 的 累积次数就是 细 胞 的 代 数。 细 胞 培 养 是 一 种 程 序复 杂 、 要求条 件 多 而严格的 实 验 性 工 作 。 所有 离体 细 胞的 生 长 都受温度、 渗透压、 pH 值、 无机盐影响， 消毒、 配液等均有 严格的 规范和要求， 特别是 无菌操 作 是 细 胞 培 养 成 败的 关键。 3.实 验 用 品 3.1 材料和标本 乳 兔、 HeLa 细 胞 (人 宫颈癌细 胞 ) 3.2 器材和仪器 手术 器械、 平皿、 培 养 瓶、 吸管、 离心管(...