精品文档---下载后可任意编辑microRNA-21 调控 A549 细胞抑癌基因 PTEN 的讨论的开题报告摘要:miR-21 是一种常见的 microRNA,在许多肿瘤中都高表达,并与肿瘤的进展和转移有关。然而,其作用机制仍不完全清楚。PTEN 是一种抑癌基因,与多种癌症密切相关。本讨论旨在探究 miR-21 对 A549 细胞中 PTEN 的调控作用。讨论内容:1. 确认 miR-21 对 A549 细胞中 PTEN 的调控作用。2. 探究 miR-21 对 A549 细胞增殖、侵袭和凋亡的影响。3. 单细胞转录组测序分析,进一步探究 miR-21 对 A549 细胞中基因表达的影响以及 miR-21 和 PTEN 之间的调控关系。方法:1. 采纳 Western blotting 和 qPCR 检测 miR-21 和 PTEN 的表达水平,验证miR-21 对 PTEN 的调控作用。2. 采纳 CCK-8 和 Clone formation 实验检测 A549 细胞增殖能力,采纳Transwell 实验检测 A549 细胞侵袭能力,采纳 Annexin V-FITC/PI 染色和流式细胞术检测 A549 细胞凋亡率。3. 采纳 10X Genomics Chromium Single Cell 3’全长转录组分析 A549 细胞不同个体之间的基因表达和 miRNA 表达差异及 miRNA 与基因之间的调控关系。意义:1. 揭示了 miR-21 的作用机制,有助于深化了解肺癌进展和转移的分子机制。2. 理解 miR-21 和 PTEN 的调控关系,可能为肿瘤治疗提供新思路。3. 单细胞转录组测序分析为进一步了解肿瘤细胞异质性及其进展提供依据。