精品文档---下载后可任意编辑mir-541 及 mir-301a 对 PC12 细胞突触发育的影响的开题报告标题：mir-541 及 mir-301a 对 PC12 细胞突触发育的影响讨论背景：神经递质释放从神经突触是神经元之间通讯传递重要方式。根据突触发育的多阶段过程，包括神经元增殖分化、轴突的生长和树突的形成和成熟，我们能预见地将突触发育作为讨论神经变性疾病的关键性方向之一。在突触形成的过程中，miRNA 常被发现作为重要调节因子。例如，mir-541 和 mir-301a 与神经元发育、突触可塑性相关的靶基因有高度共享，在胚胎期、额叶皮层中广泛表达。但是目前对于两者在神经元发育突触发育中的作用尚未有全面的讨论，因此我们希望通过对 PC12 细胞系进行体外实验来进一步探究两者对神经元突触发育的调节作用。讨论方法：1. 实验设计：本实验采纳 miRNA 对 PC12 细胞系进行体外干预，观察其对神经元突触发育形成的影响。miRNA 的体外干预分为共转染 miRNA 与目的蛋白质（如 GluR1、PSD-95）共沉默和单独体外转化 miRNA 两种设计。2. 实验操作：1）细胞培育：采纳 PC12 细胞株，分别根据 miRNA 转染实验组、对比组预留条件下无血清缓冲液培育 24 小时。2）全细胞内录法：利用细胞—内杆状电极技术记录细胞内电信号活动 IPSC、EPSC 等事件，用来刻画突触传递力学性质的变化。3）分子生物学实验：分析各组细胞 miRNA 表达情况、靶标蛋白表达水平及信号途径的活性变化。预期结果：本实验预期能够确定 mir-541 及 mir-301a 对 PC12 细胞突触发育的影响，并明确其可能的调控机制，为今后在神经变性疾病等方面提供深化的讨论依据。
