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NaCL浓度和茎环内的碱基结构对shRNA退火影响的研究的开题报告

NaCL浓度和茎环内的碱基结构对shRNA退火影响的研究的开题报告_第1页
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精品文档---下载后可任意编辑NaCL 浓度和茎环内的碱基结构对 shRNA 退火影响的讨论的开题报告引言:RNA 干涉(RNAi)是一种重要的基因沉默机制,可以利用小分子 RNA(如shRNA)诱导基因表达的平稳减少。在 RNAi 中,shRNA 被导入到细胞中,并被Dicer 酶切割成小分子 siRNA。然后,siRNA 将与 Argonaute 蛋白结合,形成 RNA导向复合物(RISC),并寻找目标 RNA 以降解其基因。然而,shRNA 的退火性可能会影响 siRNA 的选择性和功能。在本讨论中,我们着重探究 NaCL 浓度和茎环内碱基结构对 shRNA 的退火影响,以了解他们对 shRNA效能的影响。 讨论问题:这项讨论的主要问题是确定 NaCL 浓度和茎环内碱基结构对 shRNA 退火的影响,以及它们对 siRNA 选择性和功能的影响。 讨论方法:我们将设计和综合几个 shRNA 序列,这些序列在退火条件下被测试。这些序列将包括不同的 NaCL 浓度和不同的茎环内碱基结构。这些序列将在退火器中处理,并使用聚丙烯酰胺凝胶电泳诱导去氧核糖核酸(DNA)的电泳迁移来测试其不同结构的效果。然后,我们将切割这些序列,并转化为小分子 siRNA,检测它们对靶基因的效果。这些小分子 siRNA 的选择性将通过基因组学和蛋白质组学方法进行评估。讨论成果和意义:该讨论将提供有关 NaCL 浓度和茎环内碱基结构对 shRNA 退火的影响的重要见解。这将有助于优化 shRNA 设计和优化 RNAi 响应。这项讨论还将提供一些新的理解,以及有助于解决 RNAi 中引发的不首选问题。此外,该讨论还可以促进以人类疾病为靶点的新型 RNAi 治疗方法的开发。

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