精品文档---下载后可任意编辑NaCL 浓度和茎环内的碱基结构对 shRNA 退火影响的讨论的开题报告引言：RNA 干涉（RNAi）是一种重要的基因沉默机制，可以利用小分子 RNA（如shRNA）诱导基因表达的平稳减少。在 RNAi 中，shRNA 被导入到细胞中，并被Dicer 酶切割成小分子 siRNA。然后，siRNA 将与 Argonaute 蛋白结合，形成 RNA导向复合物（RISC），并寻找目标 RNA 以降解其基因。然而，shRNA 的退火性可能会影响 siRNA 的选择性和功能。在本讨论中，我们着重探究 NaCL 浓度和茎环内碱基结构对 shRNA 的退火影响，以了解他们对 shRNA效能的影响。 讨论问题：这项讨论的主要问题是确定 NaCL 浓度和茎环内碱基结构对 shRNA 退火的影响，以及它们对 siRNA 选择性和功能的影响。 讨论方法：我们将设计和综合几个 shRNA 序列，这些序列在退火条件下被测试。这些序列将包括不同的 NaCL 浓度和不同的茎环内碱基结构。这些序列将在退火器中处理，并使用聚丙烯酰胺凝胶电泳诱导去氧核糖核酸（DNA）的电泳迁移来测试其不同结构的效果。然后，我们将切割这些序列，并转化为小分子 siRNA，检测它们对靶基因的效果。这些小分子 siRNA 的选择性将通过基因组学和蛋白质组学方法进行评估。讨论成果和意义：该讨论将提供有关 NaCL 浓度和茎环内碱基结构对 shRNA 退火的影响的重要见解。这将有助于优化 shRNA 设计和优化 RNAi 响应。这项讨论还将提供一些新的理解，以及有助于解决 RNAi 中引发的不首选问题。此外，该讨论还可以促进以人类疾病为靶点的新型 RNAi 治疗方法的开发。
