精品文档---下载后可任意编辑NCAM 三种亚型高表达细胞模型的建立与低剂量铅对其表达的影响的开题报告背景：NCAM 是一种胞外域（EC）、跨膜域（TM）及细胞内域（IC）均具有功能的蛋白质，可转录出多种亚型。NCAM 在生物体内广泛存在，参加着胚胎发育、神经系统的形成、细胞增殖、细胞黏附等生理过程。近年来，越来越多的讨论表明，一些环境污染物，如铅等对 NCAM 的表达和功能有一定的影响，因此 NCAM 成为了环境污染和健康领域的重要讨论对象。为了讨论铅对 NCAM 的影响，需要建立 NCAM 高表达的细胞模型。讨论意义：① 探究铅对 NCAM 表达的影响机制及其对生物体健康的危害。②为NCAM 的功能讨论提供高表达的细胞模型。③为 NCAM 亚型特异的讨论提供相应的细胞模型。讨论方法：首先，根据文献，筛选出 NCAM 不同亚型的编码基因，利用基因克隆技术将其分别克隆入表达载体进行构建。接着，采纳电穿孔等方法将包含不同 NCAM 亚型的表达载体转染到不同细胞系中，如 293T 细胞、PC12 细胞和 Neuro-2a 细胞等，并通过 Western blot、免疫荧光等方法检测 NCAM 在不同细胞系中的表达情况。最后，给予不同浓度的铅处理，检测铅对 NCAM 表达的影响。预期结果：成功构建出 NCAM 三种亚型高表达的细胞模型，并分别检测到不同亚型在细胞中的表达情况。在铅处理后，不同亚型的 NCAM 表达量将受到不同程度的抑制，不同细胞系间也存在差异。具体差异将在后续实验中进一步确定。结论：铅对 NCAM 表达的影响具有亚型特异性和细胞特异性，NCAM 在不同亚型和不同细胞系中的表达情况和铅的剂量、时间等有关。通过本实验的结果，可以为探究铅的作用机制、NCAM 功能的讨论以及 NCAM 的临床应用提供一定的参考。
