精品文档---下载后可任意编辑p53 对 PA28γ 基因转录调控的影响的开题报告一、讨论背景及意义p53 是一种重要的细胞周期调控蛋白，其功能失调与多种肿瘤的发生密切相关。讨论表明，p53 不仅仅是一种抑癌基因，还能对许多基因的转录进行调控。比如，p53 可以通过直接结合 DNA 的方式对某些靶基因进行转录的抑制或激活，并进而对细胞周期的进程和 apoptotic response 等方面产生决定性影响。PA28γ 是一种与蛋白质降解相关的以 ATP 为驱动力的免疫活性复合物，主要存在于细胞核内。需要注意的是，在过去的讨论中已经有很多证据显示，PA28γ 的异常表达也与肿瘤的发生和进展有很大关联。因此，我们要探究 p53 对 PA28γ 基因转录调控的影响，对阐明肿瘤的发生机制和寻找治疗肿瘤的新靶点、设计新的治疗方案等都具有极其重要的意义。二、讨论内容及方法我们将在人类胚胎肺成纤维细胞 （HELF 细胞）中，使用 RT-PCR、Western blot 等技术，讨论 p53 对 PA28γ 基因的转录和翻译调控作用。具体方法如下：1. 构建 PA28γ 启动子、p53 表达质粒和空质粒。2. 观察 p53 表达质粒对 HELF 细胞中 PA28γ mRNA 表达的影响3. 分别用 PCA、HDM、DOX 刺激 HELF 细胞，并以 p53 siRNA 抑制细胞内 p53 的表达，再使用 RT-qPCR 来测定细胞内的 PA28γ 基因的 mRNA 表达量。4. Western blot 检测细胞内 PA28γ 蛋白的表达量。五、预期结果估计本讨论结果将从两个方面对 p53 对 PA28γ 基因转录调控的影响进行讨论。一方面，可以了解 PA28γ 在肿瘤的发生和进展中的作用，进一步探究肿瘤的发生机理；另一方面，可以探讨以 p53 作为肿瘤治疗和预防方案设计的靶点的有效性，寻找新的肿瘤治疗途径。
