精品文档---下载后可任意编辑SREBP--1c 对骨骼肌细胞 IRS--1 表达调控的影响的开题报告一、讨论背景内质网应激和脂质代谢紊乱是 2 型糖尿病等代谢性疾病的病理基础
其中,SREBP(sterol regulatory element-binding protein)家族是脂质代谢调控的主要分子,负责调节多种脂质代谢酶的基因表达
IRS-1(insulin receptor substrate-1)是胰岛素信号转导途径中的重要分子,平常并未直接与 SREBP-1c 关联,但其异常表达会影响骨骼肌的胰岛素信号传递
因此,本讨论着眼于探究 SREBP-1c 对骨骼肌细胞IRS-1 表达的调控作用,为其病理学机制的揭示提供更加深化的理论基础
二、讨论问题1
SREBP-1c 在骨骼肌细胞中的表达情况是怎样的
SREBP-1c 对骨骼肌细胞 IRS-1 的表达有何影响
SREBP-1c 对骨骼肌细胞 IRS-1 表达的调控机制是什么
三、讨论方法1
细胞培育:选取小鼠 C2C12 骨骼肌细胞进行培育,分为对比组和实验组
干扰 SREBP-1c 基因:采纳 RNAi 技术干扰 SREBP-1c 的表达,分别转染 siRNA 和 shRNA 载体,实验组分别为 siRNA 和 shRNA 组
检测 IRS-1 表达:通过 Western blot 法检测各组细胞中 IRS-1的表达情况,并比较各组之间的差异
分析调控机制:通过 RT-qPCR 和 ChIP-qPCR 技术分别检测SREBP-1c 和 IRS-1 基因的转录和 SREBP-1c 对 IRS-1 基因的启动子结合情况
四、预期结果1
SREBP-1c 在骨骼肌细胞中表达水平较高
SREBP-1c 的干扰将会显著增加 IRS-1 的表达水平
SREBP-1c 通过直