精品文档---下载后可任意编辑一粒小麦软粒基因表达载体的构建及遗传转化开题报告题目：一粒小麦软粒基因表达载体的构建及遗传转化一、讨论背景小麦（Triticum aestivum L.）是全球重要的粮食作物之一，而硬粒小麦种植面积较广，但由于其含有高浓度的蛋白质和脂肪，使得其面筋质地过于硬，制作出的面包和面食口感较差。相比较而言，软粒小麦的面筋质地更加柔软，味道更好。因此，转化一些硬粒小麦的基因以使其呈现出软粒小麦的性状有很好的应用前景。二、讨论内容1. 一粒小麦软粒基因的克隆设想通过设计一对引物，对小麦的 RNA 库进行 PCR 扩增，得到小麦的软粒基因。然后将其连接至一载体的多克隆位点，PCR 扩增后测序，获得一个软粒小麦表达载体。2. 提取小麦种子 DNA使用 CTAB 法提取小麦种子中的 DNA，将提取出的 DNA 用琼脂糖凝胶电泳鉴定，并测定其纯度和浓度。3. 构建表达载体将克隆的软粒基因片段插入至表达载体的限制酶切位点，经过 PCR扩增后纯化，经 SalI/BamHI 双酶切释放目的片段，之后经 Klenow 酶内切反应，接上 HindIII/BamH1 片段，并进一步纯化后将其导入大肠杆菌中，获得大量表达载体。4. 小麦的遗传转化使用农杆菌介导法将表达载体导入小麦愈伤组织中，通过筛选获得含有软粒遗传基因的转基因小麦植株。三、讨论意义转化出的软粒小麦可以用于制作口感较好的面包和面条，具有很好的应用前景。同时，讨论过程可能为其他小麦品种的转基因讨论提供一定的借鉴意义。
