精品文档---下载后可任意编辑骨髓基质细胞诱导神经干细胞分化的蛋白质的微阵列分析的开题报告一、讨论背景和意义神经干细胞可分化为多种成熟神经细胞，有望用于神经系统损伤的修复，对于神经退行性疾病的治疗具有宽阔的前景。因此，寻找可大量培育维持神经干细胞的温柔而高效的诱导分化方法，是神经干细胞讨论领域的热点和难点之一。骨髓基质细胞是一种重要的间充质细胞，可以分泌多种细胞因子和生长因子，在维持神经干细胞生存和促进神经干细胞分化等方面发挥重要作用。已有讨论表明，骨髓基质细胞可以诱导神经干细胞向神经元和胶质细胞分化。因此，本讨论将利用微阵列技术，分析骨髓基质细胞诱导神经干细胞分化过程中不同时间点的基因表达谱，寻找关键的蛋白质调控网络，揭示神经干细胞分化的分子机制，为神经干细胞的治疗应用提供理论基础和实验依据。二、讨论内容和方案1.培育和鉴定神经干细胞和骨髓基质细胞以 C57BL/6 小鼠为供体，采纳颈段后脊髓分离、酶消化和机械分散法制备胚胎神经干细胞，采纳骨髓细胞贴壁法培育骨髓基质细胞。通过免疫荧光法和流式细胞术鉴定神经干细胞和骨髓基质细胞的表型。2.骨髓基质细胞诱导神经干细胞分化将神经干细胞接种于骨髓基质细胞培育上清中，培育时间为8、12、16、20、24h。采纳免疫荧光法和 RT-qPCR 检测神经干细胞分化为神经元和胶质细胞的分化程度。3.微阵列分析将不同时间点的骨髓基质细胞培育上清收集，提取 RNA 并制备标记探针。将标记后的探针杂交到生物芯片上检测差异表达基因，并进行生物信息学分析，筛选具有重要功能的蛋白质在神经干细胞分化过程中的作用。4.功能验证筛选重要蛋白质并验证其在神经干细胞分化过程中的作用。通过转染干扰 RNA和蛋白质表达载体，检测神经干细胞的分化能力和分化产物。三、预期结果通过骨髓基质细胞诱导神经干细胞分化的微阵列分析，揭示神经干细胞分化的分子机制，找到关键的蛋白质调控网络，为神经干细胞的治疗应用提供理论基础和实验依据。
