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实验8植物组织中可溶性糖含量的测定(蒽酮比色法)

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1 实验方案 一、 实验目的 通过实验,掌握测定萝卜品质的方法 (一) 萝卜外部形态的测定 1、 实验材料 取鲜样3 个∕小区 直尺、蒸馏水、笔、记录本、吸水纸 2、 实验方法 .用自来水将各组萝卜洗净后,再用蒸馏水洗涤,擦干表面水分.每个小区取3 个重复,用电子天平称量每株的鲜重,用直尺测量植株的茎长、茎粗、叶长,取平均值作为指标值 实验(二) 植物体内可溶性糖含量的测定(蒽酮法) 一、实验目的 了解蒽酮法测定可溶性糖含量的原理;掌握分光光度计的使用 二、实验原理 糖类物质是构成植物体的重要组成成分之一,也是新陈代谢的主要原料和贮存物质。不同载培条件,不同成熟度都可以影响水果、蔬菜中糖类的含量。因此对水果、蔬菜中可溶性糖的测定,可以了解和鉴定水果、蔬菜品质的高低。 蒽酮比色定糖法是一个快速而方便的定糖方法,在强酸性条件下,蒽酮可以与游离的或多糖中存在的己糖、戊糖及己糖醛酸(还 原性和非还 原性)作用生 成蓝 绿 色的糖醛衍 生 物,其 颜 色的深 浅 与糖的含量在一定范 围 内成正 比。蒽酮也可以和其 他 一些 糖类发 生 反 应 ,但 显 现 的颜 色不同。当 存在含有 较 多色氨 酸的蛋 白 质时 ,反 应 不稳 定,呈 现 红 色。上述 特 定的糖类物质,反 应 较 稳 定。该 法特 点 : 灵 敏 度高,测定量少 ,快速方便。 三 、材料、仪 器 及试 剂 2 1.材料:植物种子、白菜叶、柑桔 2.仪器:分光光度计;恒温水箱; 20ml 具塞刻度试管(3 支) 漏斗;100ml 容量瓶;刻度试管;试管架;剪刀;研钵 3.试剂 (1)200μg/ml 标准葡萄糖:AR 级葡萄糖 100mg,蒸馏水溶解,定容至500ml。 (2)蒽酮试剂:1g 蒽酮,用乙酸乙酯溶解,定容至 50ml,棕色瓶避光处贮藏; (3)浓硫酸 四、实验方法 1.葡萄糖标准曲线的制作 取 6 支 20ml 具寒试管,编号,按下表数据配制一系列不同浓度的标准葡萄糖溶液。在每管中均加入 0.5ml 蒽酮试剂,再缓慢地加入 5ml 浓H2SO4,摇匀后,打开试管塞,置沸水浴中煮沸 10 分钟,取出冷却至室温,在 620nm 波长下比色,测各管溶液的光密度值(OD),以标准葡萄糖含量为横坐标,光密度值为纵坐标,作出标准曲线。 管 号 1 2 3 4 5 6 标准葡萄糖原液(ml)(200μg/ml) 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 蒸 馏 水 2.0 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 葡萄糖含量(μg) 0...

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