精品文档---下载后可任意编辑麻黄水提液体外抗 RSV 实验讨论的开题报告一、讨论背景呼吸道合胞病毒（RSV）是一种主要引起儿童急性下呼吸道感染的病原体。病毒感染后会引起喉炎、支气管炎、肺炎等呼吸系统疾病。目前没有针对 RSV 的特异性治疗方法，预防和对症治疗是目前主要手段。讨论发现，麻黄中的麻黄碱等生物活性物质具有抗病毒活性，因此探究麻黄水提液对 RSV 的抗病毒作用，对 RSV 的治疗具有重要意义。二、讨论目的本讨论旨在探究麻黄水提液在体外对 RSV 的抗病毒作用，为寻求RSV 治疗新思路提供基础讨论支持。三、讨论内容1、提取麻黄水提液取麻黄 50 克，加水 1000ml，加热至 90℃，煮沸后维持 90℃水浴 2 小时，冷却澄清，滤过，蒸发至常压下比容为 0.5g/mL 的麻黄水提液。2、检测麻黄水提液的生物活性物质含量通过高效液相色谱法检测提取的麻黄水提液中麻黄碱、伪麻黄碱、苯丙氨酸、酪氨酸的含量。3、体外抗 RSV 实验3.1 肺细胞株的选择与培育选择 Vero 细胞株进行培育，以 DMEM 培育基为基础，加入 10%热灭 FBS，然后加入 1%的 L-谷氨酸，调整至 PH 为 7.2-7.4。3.2 细胞准备与操作将 Vero 细胞接种于 96 孔板中，每个孔内含有 1×10^4/ml Vero细胞，细胞密度达到 80%后，加入不同浓度的麻黄水提液，并采纳未加入麻黄水提液的 Vero 细胞为对比组，培育 24 小时后，取出细胞，计算感染率，同时测定细胞增殖率。3.3 RSV 感染与 TCID50 法检测将已感染 RSV 的 Vero 细胞通过离心法分离，抽提病毒液，检测TCID50 值。精品文档---下载后可任意编辑3.4 抗 RSV 作用的评价分别将不同浓度的麻黄水提液作用于已感染 RSV 的细胞，通过TCID50 实验，计算病毒复制率和抑制率，分析麻黄水提液的抗 RSV 作用。四、预期结果本讨论将确定麻黄水提液中生物活性物质含量，探究麻黄水提液对RSV 的抗病毒作用，在体外讨论中评价该水提液的抑制效果。五、结论本讨论预期将揭示麻黄水提液对 RSV 的抗病毒作用和抑制效果，为开发和研制抗 RSV 新药提供理论基础支持。
