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影响凯氏定氮法测定粗蛋白准确性应注意的问题

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影响凯氏定氮法测定粗蛋白准确性应注意的问题 随着饲料行业的飞速发展,饲料原料及其饲料产品的价格也居高不下。而粗蛋白的检测是评定饲料原料及其产品的重要指标之一,目前常用的为凯氏定氮法(经常使用粗蛋白测定仪来测定饲料总粗蛋白的含量),即国家颁布的《饲料中粗蛋白的测定方法》(GB1996-6432)。但是该方法也存在着测定过程较复杂、费时等缺陷,测定时除严格按照规定程序操作外,还需要一定的实验技巧和实践经验。因此有很多饲料企业在实际操作过程中总是出现各种问题,导致检测结果异常而不知如何去分析。本文以GB/T6432-1994 为准,针对影响凯氏定氮对测定结果标准性应注意的细节问题和大家共同探讨。 1 试剂的配制 粗蛋白测定中所用的化学药品如浓硫酸、盐酸、氢氧化钠、硼酸、硫酸铜、硫酸钾( 硫酸钠)、硫酸铵、蔗糖等均为化学纯试剂,标定盐酸标准溶液用的无水碳酸钠为基准试剂。在配制试剂前一定要用 p H 试纸或酸度计检测一下蒸馏水是否为中性,所用的烧杯、试剂瓶等配液设备清洗干净。 1.1 盐酸标准溶液的配制 配制的盐酸标准溶液尽量为低浓度,一般C(HCl)=0.02 ~ 0.05mol ? L-1。低浓度虽然用量大,但可减少操作误差和读数误差。配制盐酸标准溶液一定要严格按照标准操作进行,基准无水碳酸钠已定于270 ~ 300℃灼烧至恒重,称准至 0.0001g,做 4 ~ 6 个平行样,去掉最高值和最低值后取平均值,同时还要做空白试验。盐酸标准溶液的配制量尽量不要太多、使用时间太长,防止水分蒸发和盐酸挥发而影响其浓度的准确性。 1.2 其他试剂的配制 400g ? L-1 氢氧化钠溶液、20g ? L-1 硼酸溶液、混合指示剂(1g ?L -1 甲基红乙醇溶液与 5g ? L -1 溴甲酚绿乙醇溶液等体积混合) 等主要是在称量时要做到快、准、稳,再就是防止使用时间太长,特别是混合指示剂不要超过 3 个月。 2 试样的选取和制备 2.1 采样 饲料原料及产品的容积和质量往往很大,因此所采集的样品必须具有代表性,否则,即使一系列的分析工作非常精密、准确,其意义都不大,有时甚至会得出错误的结论,所以应采用正确的采样方法。采样应从具不同代表性的区域取几个样点,然后充分混合为整个饲料的代表样品,然后再从中分出一小部分作为分析样品。在采样过程中应做到随即、客观,避免受人为和主观因素的影响。还有一点应该注意,就是所采集的样品必须具有一定数量。其采集数量的多少应视饲料原料和产品水分含量、颗粒大小、...

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