微生物学实验指导 黄文芳 张 松 编著 华南师范大学生命科学学院 第一部分 基础实验 实验 1 培养基的配制 一、实验目的和内容 目的：学习和掌握配制培养基的一般方法和步骤。 内容：1．牛肉膏蛋白陈培养基的配制。 2．高氏1 号培养基的配制。 3．马丁氏培养基的配制。 二、实验材料和用具 牛肉膏、蛋白胨、琼脂、可溶性淀粉、葡萄糖、孟加拉红、链霉素、1mol/L NaOH、lmol/L HCl、KNO3、NaCl、K2HPO4·3H2O、MgSO4·7H2O、FeSO4·7H2O。 试管、三角瓶、烧杯、量筒、玻璃棒、天平、牛角匙、pH 试纸、棉花、牛皮纸、记号笔、线绳、纱布、漏斗、漏斗架、胶管、止水夹等。 三、操作步骤 （一）牛肉膏蛋白胨培养基的配制 牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。其配方如下： 牛肉膏3g，蛋白胨10g，Nacl5g，琼脂15～20g，水 1000mL，PH7.4～7.6 1．称药品 按实际用量计算后，按配方称取各种药品放入大烧杯中。牛肉膏可放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶解后倒入大烧杯；也可放在称量纸上称量，随后放入热水中，牛肉膏使与称量纸分离，立 即 取出 纸片 。蛋白胨极 易 吸 潮 ，故 称量时 要 迅 速 。 2．加热溶解 在烧杯中加入少 于 所 需 要 的水量，然 后放在石 棉网 上，小火 加热，并 用玻棒搅 拌 ，待 药品完 全 溶解后再 补 充 水分至 所 需 量。若 配制固 体 培养基，则 将 称好 的琼脂放入己 溶解的药品中，再 加热融 化 ，此 过 程 中，需 不 断 搅 拌 ，以 防 琼脂糊 底 或溢 出 ，最后补 足所 失 的水分。 3． 调 pH 检 测 培养基的pH，若 pH 偏 酸 ，可滴 加lmol/L NaOH，边 加边 搅 拌 ，并 随时 用pH 试纸检 测 ，直 至 达 到 所 需 pH 范围 。若 偏 碱 ，则 用lmol/L HCl 进 行 调 节 。pH 的调 节通常 放在加琼脂之 前 。应注 意 pH 值 不 要 调 过 头 ，以 免 回 调 而 影 响 培养基内各离子 的浓 度 。 4．过 滤 液 体 培养基可用滤 纸过 滤 ，固 体 培养基可用4 层 纱布趁 热过 滤 ，以 利 培养的观 察 。但 是供 一般使用的培养基，这 步可省 略 。 5．分装 按实验要 求 ，可将 配制的培养基分装 入试管或三角瓶内。分装 时 可用漏斗以免 使培养基沾 在管口 或瓶口 上而 造 成 污 染 。 分装 量：...
