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杜仲成分的提取与分离

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一 杜仲是我国特有的一种传统的名贵中药材,具 有降血压、降血脂、降血糖、抗氧化、抗肿瘤、抗病 毒、抗炎、抗菌、增强机体免疫力、治疗心血管疾病 等生物活性,其药用价值历来受到人们的关注[1]。在 早期的报道中主要是针对杜仲皮的研究,但是杜仲 皮取材困难、成本高。大量现代医学研究证实了杜 仲叶与皮的化学成分基本一致,具有同等功效,特 别是绿原酸和黄酮的含量远高于皮中的含量,因 此,对产量高、价格便宜的杜仲叶中有效成分进行 研究具有一定的实用价值。笔者研究NKA- Ⅱ树脂 对杜仲叶中绿原酸和黄酮类化合物吸附和分离的 效果,并对其分离工艺进行优化,以期为杜仲叶相 关产品的深开发与生产提供参考。 4 二 ,Heidolph 旋转蒸发仪,UNICO UV- 2102 PC 型分光光度计;芦丁标准品、绿原 酸标准品(中国药品生物制品检 定所 ) ,其它 试 剂 均 为分析 纯 。 1.2 样 品预 处 理 及 测 定方 法 1.2.1 样 品预 处 理 用70%乙 醇 水 溶 液 作 为提取 剂 ,按 照 料 液 比 1∶ 12,pH 值为4,每 次 提取25 min,提取3 次 ,合并滤 液 并浓 缩 至 无 醇 味 后 ,冷 冻 干燥,得到杜仲叶粗提物,在干燥避光条件下保存。 1.2.2 绿原酸及总黄酮的测定紫外可见分光光 度法测定绿原酸的含量[3]和总黄酮的含量[2]。 1.2.3 高效液相色谱法(HPLC)检测杜仲叶分离产 物色谱条件色谱柱:ACQUITY UPLC BEH C18 (100 mm×2.1 mm,1.7μm)(美国WATERS 公司); 柱温25℃;流速0.35 mL/min;检测波长365 nm;进 样量5 μL;流动相采用梯度洗脱。 1.3 树脂的选择 采用9 种大孔吸附树脂对杜仲叶中绿原酸、总 黄酮的吸附- 解吸分离性能进行研究,可为规模化 分离绿原酸、总黄酮提供理论依据。 1.4 大孔树脂预处理 先将各种树脂分别用蒸馏水溶胀12 h 后浮 选,然后用95%乙醇浸泡24 h 后,用蒸馏水洗至无 浑浊现象,无醇味为止。再用1 mol/L NaOH 溶液浸 泡24 h,用蒸馏水洗至中性。然后用1 mol/L HCl 浸 泡24 h,用蒸馏水洗至中性。最后用20%乙醇浸泡 储备。 1.5 静态吸附-解吸试验 首先对9 种大孔树脂的吸附量、吸附率和解吸 率进行测定[5],其次分别考察吸附液pH 值和不同 乙醇浓度对NKA- Ⅱ树脂静态吸附的影响[6]。 1.6 动态吸附-洗脱试验 在室温下,根据静态吸附- 解吸试验的条件, 考察上柱液流速、上柱液浓...

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