柱 层 析 分 离 色 素 一 、【 实 验 目 的 】 1． 了 解 柱 层 析 的 分 类 ， 掌 握 各 种 柱 层 析 的 原 理 。 2． 熟 练 掌 握 吸 附 层 析 的 原 理 和 操 作 技 术 。 二 、【 实 验 原 理 】 叶 绿 体 色 素 是 植 物 吸 收 太 阳 光 能 进 行 光 合 作 用 的 重 要 物 质 ， 主 要 有 叶 绿 素 a、 叶 绿 素 b、胡 萝 卜 素 和 叶 黄 素 组 成 。 从 植 物 叶 片 中 提 取 和 分 离 叶 绿 体 色 素 是 对 其 认 识 和 了 解 的 前 提 。 利用 叶 绿 体 色 素 能 溶 于 有 机 溶 剂 的 特 性 ， 可 用 95%乙 醇 或 无 水 乙 醇 提 取 。 分 离 色 素 的 方 法 有 多 种 ， 如 纸 层 析 、 柱 层 析 等 。 柱 层 析 法 是 色 谱 法 中 的 一 种 ， 它 是 根 据混 合 物 中 各 组 分 对 固 定 相 的 吸 附 能 力 ， 以 及 对 洗 脱 剂 （ 即 移 动 相 ） 的 溶 解 度 不 同 将 各 组 分 分离 。 常 用 的 柱 色 谱 有 吸 附 色 柱 谱 和 分 配 柱 色 谱 两 类 。 吸 附 柱 色 谱 通 常 是 在 玻 璃 管 中 填 入 表 面积 很 大， 经过活化的 多 孔性 物 质 或 粉状固 体 作 为吸 附 剂 （ 如 氧化铝或 硅胶）， 当混 合 物 的 溶 液流经吸 附 柱 时， 就被吸 附 在 柱 的 上端， 然后从 柱 顶加入 溶 剂 （ 洗 脱 剂 ） 洗 脱 。 由于 不 同 化合物 在 吸 附 柱 上的 吸 附 能 力 不 同 ， 在 同 一 溶 剂 中 的 溶 解 度 也不 同 ， 因此各 组 分 随溶 剂 以 不 同 速度 下移 ， 形成 色 带。 继续用 溶 剂 洗 脱 ， 吸 附 能 力 最弱的 组 分 就随溶 剂 首先流出， 整个层 析 过程进 行 反复的 吸 附 -解 析 -再吸 附 -再解 吸 。 用 柱 层 析 法 可 以 分 别收 集各 组 分 ， 并逐个鉴定 。 本实 验 是 把三氧化二 铝填 入 玻 璃 管 中 （ 压成 柱 状） 作 为吸 附 剂 ， 将 叶 绿 体 色 素 的 石油醚提 取 液倾于 吸 附 柱 上， 色 素 即 被吸 附 。 ...
