植物生理学实验指导

1 实验1 植物组织渗透势的测定（质壁分离法） 原 理 当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平衡状态，植物细胞内的压力势为零时，细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势。该溶液的浓度称为等渗浓度。 当用一系列梯度浓度溶液观察细胞质壁分离现象时，细胞的等渗浓度将介于刚刚引起初始质壁分离的浓度和尚不能引起质壁分离的浓度之间的深液浓度。代入公式即可计算出春渗透势。 仪器药品 显微镜 载玻片及盖玻片 镊子 刀片 配成0.5—0.1mol/L 梯度浓度的蔗糖溶液各 50ml。 称34.23g 蔗糖用蒸馏水配成100ml，其浓度为1m0le/L（母液）。再配制成下列各种浓度： 0.50mol/L：吸母液25ml+水 25ml 0.45mol/L：吸母液22.5ml+水 27.5ml 0.40mol/L：吸母液20.0ml+水 30.0ml 0.35mol/L：吸母液17.5ml+水 32.5ml 0.30mol/L：吸母液15.0ml+水 35.0ml 0.25mol/L：吸母液12.5ml+水 37.5ml 0.20mol/L：吸母液10.0ml+水 40.0ml 0.15mol/L：吸母液7.5ml+水 42.5ml 0.10mol/L：吸母液5.0ml+水 45.0ml 操作步骤 将带有色素的植物组织（叶片），一般选用有色素的洋葱鳞片的外表皮、紫鸭跖草、苔藓、红甘蓝或黑藻、丝状藻等水生植物，也可用蚕豆、玉米、小麦等作物叶的表皮。撕取下表皮，迅速分别投入各种浓度的蔗糖溶液中，使其完全浸入，5—10 分钟后，从 0.5mol/L 开始依次取出表皮薄片放在滴有同样溶液的载玻片上，盖上盖玻片，于低倍显微镜下观察，如 2 果所有细胞都产生质壁分离的现象，则取低浓度溶液中的制片作同样观察，并记录质壁分离的相对程度。实验中必须确定一个引起半数以上细胞原生质刚刚从细胞壁的角隅上分离的浓度，和不引起质壁分离的最高浓度。 在找到上述浓度极限时，用新的溶液和新鲜的叶片重复进行几次，直至有把握确定为止。在此条件下，细胞的渗透势与两个极限溶液浓度之平均值的渗透势相等。 将结果记录下表中。 测出引起质壁分离刚开始的蔗糖溶液最低浓度和不能引起质壁分离的最高浓度平均值之后，可按下列公式计算在常压下该组织细胞质液的渗透势。 RTiCs  s为细胞渗透势。 R 为气体常数=0.083×105/L·Pа/mol·K。 T 为绝对温度，单位 K，即 273℃+t，t为实验湿度。 I 为解离系数，蔗糖为1。 C 为等渗溶液的浓度，单位为mol/L。 则：s=0.083×105×(273℃+t)×1×C 实验人 时期 材料名称 实验时室温 ℃ 蔗糖摩尔浓度（mol/L） 渗透势（Pа） ...