植物组织中碳水化合物含量的测定(Somogyi法)

测定植物碳水化合物的含量，通常用80梍85%的酒精抽提，在此浓度的酒精溶液中，还原糖和蔗糖溶解而淀粉沉淀。过滤后在溶液中测定可溶性糖（包括还原糖和蔗糖），在残渣中测定淀粉。还原糖可根据其还原能力大小直接测定其含量。蔗糖和淀粉经水解后生成还原糖，测得其含量，然后换算成蔗糖和淀粉。纤维素用称重法，测得经酸、碱和有机溶剂处理过的样品。 Ⅰ．还原糖含量的测定 原理 重要反应如下； 1．还原糖（如葡萄糖）在碱性溶液中能将Cu2+还原为 Cu+，产生Cu2O沉淀。 2．加酸使 KI与 KIO3作用，放出 I2来。 5KI+KIO2+3H2SO4→3I2+3K2SO4+3H2O 3．放出的I2立即与 Cu2O作用。 Cu2O+H2SO4→Cu2SO4+H2O Cu2SO4+I2+K2SO4→2CuSO4+2KI 4．多余的I2用Na2S2O3滴定。 2Na2S2O3+I2→2NI+N2S4O6 将结果与空白滴定相比较，即知消耗 I2量，可间接推算出测定液中还原糖含量。 仪器药品 分析天平 台天平 烘箱 水浴锅 电动粉碎机 容量瓶 移液管 烧杯 三角烧瓶 漏斗 酒精 5%硫酸锌 1%酚酞溶液：1g酚酞溶解在 100ml95%酒精溶液中。 饱和氢氧化钡溶液：将蒸馏水煮沸，除去水中二氧化碳，冷却后加入固体 Ba(OH)2盖好，过液，次日过滤。 铜碘试剂： 溶液 A：取硫酸铜 6.5g溶于 100ml水中。 溶液 B：取酒石酸钾钠 12g，无水碳酸钠 20g，碳酸氢钠 25g溶于 500ml水中。 溶液 C：取碘酸钾 0.8g，碘化钾 10g，草酸钾 18g溶于 200梍 300m l水中。用时将溶液 B 倒入溶液 A 中，再倒入溶液 C 中，混合后稀释至1000m l，混匀。 2.5mol/L H2SO4：浓硫酸 143ml加入水中，稀释成 1000ml。 淀粉指示剂：1g淀粉溶解在 100ml水中，加热使之溶解即可。 0.005mol/L硫代硫酸钠标准溶液：参照实验 39。 操作步骤 1．抽提 将采回的植物样品，分开部位，迅速放在 60℃烘箱中烘干至恒重。剪碎后，放入电动粉碎机中粉碎。用电动分析天平分别称取样品1g，放入 250ml三角烧瓶中，加入 80%酒精 50ml，放在 70℃水浴锅中抽提 3小时，将上清液过滤（瓶内残渣不要过滤出来），再往残渣内倒入 80%酒精20ml，继续抽提 3小时，过滤。如此提取 3─5次，合并所有滤液，定容至 500ml。最后将残渣烘干，留作分析淀粉用。 2．澄清． (1)吸取酒精提取液 25ml，在水浴锅上蒸干。若溶液有酸性，可先用固体碳酸钠中和，以免酸对蔗糖的分解。 (2)蒸干后加入少量水，边搅边加入 Ba(OH)22─10ml（用量根据不同样品而定，如...