槐花米中芸香苷提取及槲皮素的分离与检识

槐花米中芸香苷提取及槲皮素的分离与检识 [适用对象] 药学专业 [实验学时] 18 学时 一、实验目的 学习黄酮类化合物的提取、分离和检识，通过实验要求： （1）通过芸香苷提取与精制，掌握沸水提取黄酮类化合物的原理和操作。 （2）掌握由芸香苷水解制取槲皮素的方法。 （3）掌握黄酮苷和黄酮苷元的分离。 （4）掌握黄酮类化合物的主要性质及黄酮苷、苷元和糖部分的检识方法。 二、实验原理 由槐花中提取芸香苷的方法很多，本实验是根据芸香苷在冷水和热水中的溶解度差异的特性进行提取和精制，或根据芸香苷分子中具有酚羟基，显弱酸性，能与碱成盐而增大溶解度，以碱水为溶剂煮沸提取，其提取液加酸酸化后则芸香苷游离析出。 三、仪器设备 单口园底烧瓶，冷凝管，铁架台，烧杯，电炉，烘箱、水浴锅、三角烧瓶，微量抽滤器，布氏漏斗，滤纸，试管，层析槽，石棉网，毛细管等。 四、相关知识点 槐花为豆科植物槐 Sophora japonica L.的干燥花及花蕾，主要含芸香苷（芦丁），含量高达12~20%，水解生成槲皮素、葡萄糖及鼠李糖。 芸香苷（rutoside），分子式C27 H30 O16，分子量610.51，淡黄色针状结晶，mp.177~178℃。难溶于冷水（1﹕8000），略溶于热水（1﹕200），溶于热甲醇（1﹕7），冷甲醇（1﹕100），热乙醇（1﹕30），冷乙醇（1﹕650），难溶于乙酸乙酯、丙酮，不溶于苯、氯仿、乙醚、石油醚等，易溶于吡啶及稀碱液中。 槲皮素（quercetin），分子式C15 H10 O7，分子量302.23，黄色针状结晶，mp.314℃（分解）。溶于热乙醇（1﹕23），冷乙醇（1﹕300），可溶于甲醇、丙酮、乙酸乙酯、冰醋酸、吡啶等，不溶于石油醚、苯、氯仿、乙醚中，几不溶于水。 OOOHOHOHOHOR芸 香 苷 R= -葡 萄 糖 - 鼠 李 糖槲 皮 素 R= H 五、实验步骤 （一）芸香苷的提取（水提取法） 称取槐花米 50 克，置 1000 ml 烧杯中，加沸水800 ml，加热保持微沸 1 小时，趁热用棉花过滤，滤渣再加 600 ml 水煮沸 1 小时，趁热过滤，合并 2 次滤液，放置夜，析出大量淡黄色沉淀，抽滤，沉淀用水洗 3~4 次，抽干置于空气中干燥即得粗芸香苷，称重计算得率。 （二）芸香苷的水解 称取芸香苷粗品2 克，尽量研细，投入500 m l 圆底烧瓶中，加 2%H2SO4 溶液150 m l，接上冷凝管，直火加热煮沸1.5 小时，滤取沉淀物（即苷元槲皮素），滤液保留以鉴定糖部分，槲皮素沉淀经水洗涤抽干，自然干燥，称重并计算水解...