matigel胶的稀释和分装步骤

在体内，基底膜是以细胞为基础的薄层细胞外基质。康宁 Matrigelmatrix 是从富含胞外基质蛋白的 EHS 小鼠肿瘤中提取的基底膜基质，其中含有约 60%层粘连蛋白、30%IV 胶原和 8%的巢蛋白。康宁 Matrigelmatrix 还含有基底膜聚糖、TGF-R 表皮生长因子、类胰岛素生长因子、组织纤溶酶原及其他生长因子为了维持凝胶化的一致性，我们推荐不要将康宁基底膜基质稀释到少于 3mg/mL。请使用冰冷的无血清培养基来稀释康宁基底膜基质。通过在冰上移液管上下吸液或涡旋小瓶来混合。薄层凝胶法1. 解冻康宁基底膜基质，吏用预冷的移液管，将康宁基底膜基质混合至均匀。2. 将培养板放置在冰上，以 50pl/cm2 向生长表面加入康宁基底膜基质。3. 将培养板放置在 37°C,30 分钟。4. 如果有必要的话，青在使用无血清培养基轻柔漂洗前吸出耒吉合的材料。请确保移液器的吸头不要刮擦包被的表面。培养板现在可以使用了。厚层凝胶法1. 解冻康宁基底膜基质，吏用预冷的移液管，将康宁基底膜基质混合至均匀。2. 将培养板放置在冰上。向康宁基底膜基质中加入细胞并使用预冷的移液管悬浮。以 150-200pl/cm2 向生长表面加入康宁基底膜基质。3. 将培养板放置在 37°C,30 分钟。现在可以添加培养基了。细胞也可以培养在这一凝胶的顶部。薄层包被法1. 依照推荐的方法解冻康宁基底膜基质。使用预冷的移液管，将康宁基底膜基质混合至均匀。2. 使用无血清培养基将康宁基底膜基质稀释到需要的浓度。对于您的应用程序，您应该完成以经验为主的研究来确定您的最适包被浓度。3. 向被包被的容器中加入稀释的康宁基底膜基质。加入的量应该足以容易地覆盖整个生长表面。在室温下培养 1 个小时。4•吸出未结合的材料并使用无血清培养基轻柔地漂洗。培养板现在可以使用了。主要问题康宁高浓度 Matrigelmatrix 用于哪些实验？康宁高浓度的 Matrigelmatrixmatrix 可适用于体内应用研究,如高浓度蛋白可促进肿瘤生长。高蛋白浓度同时可使康宁 Matrigelmatrix 注射入小鼠皮下后保持完整,有利于注射的肿瘤细胞和/或血管生成因子保持原位，便于用于原位分析和/或以后的切除。如何将康宁 Matrigelmatrix 用于 3D 培养？怎样制作 3D 胶？需要将细胞嵌入到康宁 Matrigelmatrix 中吗？康宁高浓度的 Matrigelmatrix 可适用于体内应用研究/如制备厚层包被用于 3D 细胞培养。细胞可以嵌在康宁Matrigelmatrix 中或者接种在康宁 Matrigelmatrix 表面（覆盖法...