罗氏tu nel 检测细胞凋亡试剂盒说明书 注意:Label 溶液含有甲次砷酸盐和二氯化钴,严禁吸入和食入。 反应悬浮物收集于密闭、不易碎、有明确标识的容器中,按有毒废物处理。 试剂盒组成: 小瓶/盖子 标签 内容物 1 蓝色 酶溶液 大肠杆菌重组牛胸腺末端脱氧核苷酸转移酶,在storage bu ffer 中 10×conc. 5×50ul 2 紫色 标记溶液 在reaction bu ffer 中的核苷酸混合物 1×conc. 5×550ul 3 黄色 转化-POD 抗荧光素抗体,绵羊 Fab 片段,连接有辣根过氧化物酶 Ready -to-u se 3.5ml 需要自己配置的其他物品: 除上表所列试剂外,还需准备以下溶液。下表列出每步所需物品概览: 步骤 设备 试剂 样品准备section 3.2 黏附细胞,细胞涂片和细胞离心涂片 准备 section3.2.1 冰冻组织section3.2.2.2 Washing bu ffer:磷酸缓冲液PBS* Bloking bu ffer 封闭缓冲液:溶于甲醇的3%H2O2 Fix ation solu tion 固定剂:溶于PBS 的4%多聚甲醛,ph7.4,新鲜配制 Permeabilisation solu tion 渗 透 溶液:溶于0.1%柠 檬 酸钠的0.1%Triton X-100,新鲜配制 ( 6) 固定剂 石蜡包埋组织 section3.2.2.1 二甲苯 和乙 醇( 浓 度 :95%,90%,80%,70%,溶于双蒸 水 中) Washing bu ffer:PBS* 蛋 白 酶K*,不含核酸酶,工 作 浓 度 :[10-20u g/ml,溶于10mM Tris/HCL 中,ph7.4-8] 替 代 处理方 案 ※ 渗 透 溶液:( 0.1%Triton1) X-100,溶于0.1%柠 檬 酸钠 的,新鲜配制 ※ 胃 蛋 白 酶*( 0.25%-0.5%,溶于盐酸中,ph2) 或 胰 蛋白 酶*,0.01N HCL,不含核酸酶 ※ 0.1M 柠 檬 酸缓冲液,ph6,微 波 照 射 标记步骤 section3.3 阳 性 对 照 section3.3.1 微 球 菌核酸酶或 DNase I, 重 组 , 级 别 1* 黏 附 细 胞 ,细 胞 涂 片 和 细胞离心涂片和组织 section3.3.2 Parafilm 石 蜡 封口 膜 或 盖 片 湿 盒 Washing bu ffer: PBS* Difficu lt tissu e 困 难 组 织 塑 料 容 器 微 波 湿 盒 Citrate bu ffer 柠 檬 酸 盐 缓 冲 液 , 0.1M, ph6.0 Washing bu ffer: PBS* Tris-HCL, 0.1M ph7.5, 含 3%的 BSA*和 20%正 常 牛 血清 信 号 转 换 section3.4 湿 盒 Parafilm 石 蜡 封口 膜 或 盖 片 Washing bu...