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罗氏tu nel 检测细胞凋亡试剂盒说明书 注意：Label 溶液含有甲次砷酸盐和二氯化钴，严禁吸入和食入。 反应悬浮物收集于密闭、不易碎、有明确标识的容器中，按有毒废物处理。 试剂盒组成： 小瓶/盖子 标签 内容物 1 蓝色 酶溶液 大肠杆菌重组牛胸腺末端脱氧核苷酸转移酶，在storage bu ffer 中 10×conc. 5×50ul 2 紫色 标记溶液 在reaction bu ffer 中的核苷酸混合物 1×conc. 5×550ul 3 黄色 转化-POD 抗荧光素抗体，绵羊 Fab 片段，连接有辣根过氧化物酶 Ready -to-u se 3.5ml 需要自己配置的其他物品： 除上表所列试剂外，还需准备以下溶液。下表列出每步所需物品概览： 步骤 设备 试剂 样品准备section 3.2 黏附细胞，细胞涂片和细胞离心涂片 准备 section3.2.1 冰冻组织section3.2.2.2 Washing bu ffer：磷酸缓冲液PBS* Bloking bu ffer 封闭缓冲液：溶于甲醇的3%H2O2 Fix ation solu tion 固定剂：溶于PBS 的4%多聚甲醛，ph7.4，新鲜配制 Permeabilisation solu tion 渗 透 溶液：溶于0.1%柠 檬 酸钠的0.1%Triton X-100，新鲜配制 （ 6） 固定剂 石蜡包埋组织 section3.2.2.1 二甲苯 和乙 醇（ 浓 度 ：95%，90%，80%，70%，溶于双蒸 水 中） Washing bu ffer：PBS* 蛋 白 酶K*，不含核酸酶，工 作 浓 度 ：[10-20u g/ml，溶于10mM Tris/HCL 中，ph7.4-8] 替 代 处理方 案 ※ 渗 透 溶液：（ 0.1%Triton1） X-100，溶于0.1%柠 檬 酸钠 的，新鲜配制 ※ 胃 蛋 白 酶*（ 0.25%-0.5%，溶于盐酸中，ph2） 或 胰 蛋白 酶*，0.01N HCL，不含核酸酶 ※ 0.1M 柠 檬 酸缓冲液，ph6，微 波 照 射 标记步骤 section3.3 阳 性 对 照 section3.3.1 微 球 菌核酸酶或 DNase I， 重 组 ， 级 别 1* 黏 附 细 胞 ，细 胞 涂 片 和 细胞离心涂片和组织 section3.3.2 Parafilm 石 蜡 封口 膜 或 盖 片 湿 盒 Washing bu ffer： PBS* Difficu lt tissu e 困 难 组 织 塑 料 容 器 微 波 湿 盒 Citrate bu ffer 柠 檬 酸 盐 缓 冲 液 ， 0.1M， ph6.0 Washing bu ffer： PBS* Tris-HCL， 0.1M ph7.5， 含 3%的 BSA*和 20%正 常 牛 血清 信 号 转 换 section3.4 湿 盒 Parafilm 石 蜡 封口 膜 或 盖 片 Washing bu...