色谱柱基础知识简介 一、色谱柱工作原理 当流动相中携带的混合物流经固定相时,其与固定相发生相互作用。由于混合物中各组分在性质和结构上的差异,与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同,随着流动相的移动,混合物在两相间经过反复多次的分配平衡,使得各组分被固定保留的时间不同,从而按一定次序由固定相中流出。 二、色谱柱的分类 2.1 色谱柱主要分为填充柱和毛细管柱 注 : 此 外 , 还 有 一 些 综 合 了 填 充 柱 和 毛 细 管 柱 特 点 的 特 殊 色 谱 柱 , 例如 Alltech 公 司 采 用 专 利 技 术 生 产 的 集 束 管 毛 细 管 柱 。 2.2 填充柱与毛细管柱的比较 表 1 填充柱与毛细管柱的比较 色谱柱 内径/mm 长度/m 柱材料 柱容量 载气流速 填充柱 2-5 0.5-3 玻璃或金属材质 mg 20-30mL/min 毛细管柱 0.10-0.80 10-100 熔融石英或不锈钢、 聚酰亚胺涂层 ng 1-10mL/min 注 : 毛 细 管 柱 外 层为聚酰亚胺, 可修补柱 子缺陷(即增强柔韧性)并且增加强度。 三、填充柱 3.1 填充柱的构成 3.1.1 填充柱的柱管 填充柱可以使用任何类型的柱管,只要它对样品是清洁,、惰性的, 以及能够承受GC 的柱箱温度,像:不锈钢管、玻璃管、铜管、聚四氟乙烯管、聚合物管等。 3.1.2 固体载体(颗粒)和固定相 近距离观察一个填充颗粒,会发现它是由一个固体载体(颗粒)和在它上面均匀涂渍的涂敷物(叫做固定相)所组成。 固体载体即液态固定相附着的载体,其细小、均匀、多孔,增加与样品接触的表面积。 常用的固体载体为硅土。固体载体也有不同大小的颗粒度,颗粒度是指“目数大小”。一般是根据柱径来选择固体载体的粒度,保持载体的直径为柱内径的1/20 为宜。常用60-80 目及80-100 目。 表2 直径大小与目号的关系 颗粒大小(目) 平均的直径范围 60/80 目 177 至 260μm 80/100 目 149 至 177μm 100/120 目 125 至 149μm 120/1400 目 105 至 125μm 四、毛细管柱 4.1 毛细管柱的构成 毛细管色谱柱由两个主要部分组成:管身和固定相。 4.1.1 管身 毛细管柱的管身一般使用熔融二氧化硅或不锈钢作为基本材质。 熔融二氧化硅即高纯度合成石英(以下通称熔融石英),通常在其表面涂上一层聚 酰亚胺做为保护层。 当实验要求更高的使用温度时,我们可以来用不锈钢毛细柱来代替熔融石英毛细柱。不锈钢毛细柱在使...