[分享] 免疫组织化学染色技术 法医学院 官大威第一节 常规组织学染色技术概述宏观微观超微结构基因水平组织形态学讨论技术的种类:一、病理大体组织标本的染色方法在标本制作中,为了某种特别目的,突出显示标本的重要部分,借助组织切片的特别染色方法对标本进行染色,将病变器官及不同组织成分用染料染成不同的颜色,以便于区分大体标本的不同成分和病变特点,如:..脂肪组织染色法目的:主要用于心、肝、肾脂肪变性,动脉粥样硬化大体标本的染色试剂:苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ结果:病变处脂肪组织呈橙黄色..早期心肌梗死染色法目的:显示早期心肌梗死的区域试剂:% NBT(硝基四唑蓝) / mol / L PBS(pH 方法:将 2-3 mm 厚新奇心肌大片放入试剂中,37 °C 孵育 20 min。结果:正常心肌呈蓝色,早期心肌梗死区、纤维结缔组织、瘢痕组织呈浅蓝色或不显色。注意:新奇标本,尸检心肌不超过 6 小时。二、光学显微镜下的组织学染色方法.常规 HE 染色(hematoxylin and eosin staining).组织学特别染色1. Mallory 三染色、Masson 三染色2. 神经纤维的镀银染色3. 其他的特别染色,包括钙、铁、铅、铜、黑色素和脂褐素、细胞 DNA 和 RNA 的染色等上述的各种染色方法只能在细胞水平上显示组织结构的形态改变。三、超微结构的观察.光线波长的限制,光学显微镜的分辨率极限为 μm有效放大倍数最高不超过 2000 倍。电镜的分辨率最佳可达,放大倍率最高可达 100 万倍。第二节免疫组织化学染色技术 Immunohistochemical technique 由于该技术主要是用于讨论和观察细胞中的某些结构或分子物质和组织细胞间的成分,因此现又称为免疫细胞化学技术。根据标记物的不同,免疫细胞化学技术可分为:1. 免疫荧光细胞化学技术2. 免疫酶细胞化学技术3. 免疫铁蛋白技术4. 免疫金-银细胞化学技术5. 免疫电子显微镜技术一、免疫组织化学染色方法的原理.抗原(antigen)1. 定义:是一类在适合条件下能激发机体免疫系统发生免疫应答,并能与免疫应答产生的效应物质(抗体和效应细胞)在体内或体外发生特异性结合反应的物质。抗原具有两种性能:(1)免疫原性(immunogenicity)指抗原分子具有诱导机体产生免疫应答的特性。(2)反应原性(reactogenicity)指抗原分子与抗体或效应 T 细胞等免疫应答产物发生特异性反应的特性。2. 抗原的分类------完全抗原、半抗原免疫学分类胸腺依赖抗原与非依赖抗原外源性抗原:微生物、花粉等内源...