白假丝酵母黑曲霉红色青霉绿色木霉绳状青霉大肠埃希VVVVVVVVVVVVVVVVV第一部分防腐挑战实验调研结果1 实验样品样本要求新鲜，没有被微生物污染，一般每个样本为 300g
2 微生物挑战性实验2
1 实验菌株不同国家、组织、企业对挑战实验选择的测试菌种有一定差异（如表 1），国内参照美国化妆品、香精和洗涤剂协会（CTFA）推荐的菌种（因其较具代表性，如表 2 所示），所以更为恰当
（注意菌株来源问题：同属一个种的细菌来源不同，菌株不同，MIC 值不同）表 1 某些国家、组织、企业用于化妆品微生物挑战试验的测试菌株美国美国英国德国德国菌株（药典）（ISP 公司）（药典）（Henkel 公司）（S&M 公司）肺炎克雷伯氏菌V恶臭假单胞菌V荧光假单胞菌V表2CTFA 化妆品微生物挑战试验的菌株选择种类菌株数量革兰氏阳性菌金黄色匍萄球菌表皮葡萄球菌肺炎克雷伯氏菌至少选一种阴沟肠杆菌发酵革兰氏阴性杆菌大肠埃希氏菌至少选两种变形菌属日勾维肠杆菌铜绿假单胞菌洋葱假单胞菌非发酵革兰氏阴性杆菌荧光假单胞菌恶臭假单胞菌至少选一种黄杆菌属不动杆菌属酵母白假丝酵母近平滑假丝酵母至少选一种霉菌黑曲霉黄绿青霉至少选一种产芽孢菌枯草芽孢杆菌供选用生产现场分离菌适当菌株一种以上2
2 培养基牛肉膏蛋白胨培养基、琼脂培养基2
3 试验用菌液的配置（1）标准悬液的配制1%硫酸 9
9ml 与 1%氯化钡 0
1ml，混合后配制成的悬液浓度为 3X108cfu/ml,此悬液再做 3 倍稀释
（2）细菌菌悬液的配制实验前将菌株接种到各个培养基斜面上，36 摄氏度恒温培养 48 小时
将已培养好的活性菌种，用灭菌生理盐水清洗到灭菌锥形瓶中，充分振荡摇匀
用移液枪从锥形瓶中吸取菌液作稀释，浊度和标准悬液的浊度（3X108cfu/ml）相同为止；此时的稀释菌液再做 3 倍稀释，即为所需的 1X108cfu/ml
