附件化学发光法主要生产工艺一、原理化学发光免疫分析(chemiluminescenceimmunoassay,CLIA),是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合,用于各种抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术
化学发光免疫分析包含两个部分,即免疫反应系统和化学发光分析系统
免疫反应系统是将发光物质(在反应剂激发下生成激发态中间体直接标记在抗原或抗体上,或酶作用于发光底物
化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化,形成一个激发态的中间体,当这种激发态中间体回到稳定的基态时,同时发射出光子,利用发光信号测量仪器测量光量子产额,该光量子产额与样品中的待测物质的量成正比,由此可以建立标准曲线并计算样品中待测物质的含量
二、化学发光免疫分析的类型(一)化学发光标记免疫分析化学发光标记免疫分析又称化学发光免疫分析(CLIA),是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的免疫分析方法
常用于标记的化学发光物质有吖啶酯类化合物(AE)
(二)化学发光酶免疫分析从标记免疫分析角度,化学发光酶免疫分析(CLEIA),应属酶免疫分析,只是酶反应的底物是发光剂,操作步骤与酶免分析完全相同:以酶标记生物活性物质(如酶标记的抗原或抗体)进行免疫反应,免疫反应复合物上的酶再作用于发光底物,在信号试剂作用下发光,用发光仪进行发光测定
目前常用的标记酶为辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(ALP),它们有各自的发光底物
(三)时间分辨荧光免疫分析()是用三价稀土离子及其螯合剂作为示踪物,如铕(Eu3+)、铽(Te3+)及钐(Sm3+)、镝(De3+)等代替传统的荧光物质、放射性同位素、酶和化学发光物质,来标记抗体、抗原、多肽、激素、核酸探针或生物活性细胞,待反应体系发生后,用时间分辨荧光仪测定最后产物中的荧光强度,根据荧光强度和相对荧光强度比值,判断反