-1-BDFACSCalibur 流式细胞仪简易操作步骤一、开机1)先打开净化交流稳压电源,其次打开 110V 稳压输出电源,再次打开流式细胞仪,最后打开计算机。2)向前拉开储液箱抽屉,检查鞘液筒、废液筒水量,如需充填鞘液,先将减压阀(红色箭头所示)方向调在 VENT 位置(箭头方向),再加入超纯水,保持水位在鞘液桶的3/4 左右,加好后拧紧桶盖并将减压阀方向调在 RUN 位置。、开启 CellQuest 软件、编辑实验文件1)在屏幕下方点击 CELLQuest(第四个图标)启动软件。桌面会出现一'Untitled'实验文件,可点击实验文件的左上角的放大钮(绿色),将实验文件窗口放大。1」戸Zl-t■.-Jr-.lL'厂4A电子版本:\\NOVOPUBLIC\NovoBio\流式细胞仪\BDFACSCalibur 流式细胞仪简易操作步骤 corrZYH201405202)从工具板中点击散点图图示。在实验文件的空白区点击,拖曳对角线至适当大小,然后放开鼠标。出现散点图对话方框(当所要编辑的图窗口被选中时,会在其四角出现四个小黑块)。3)在出现的散点图对话方框中点击 PlotSource,选择 AcquisitionandAnalysis(收取、分析),确认 X 和 Y 轴参数预设为 FSC-H1024、SSC-H1024。4)从屏幕上方 Plots 菜单中选择 DotPlot 功能,可复制一个同样大小的散点图,在出现的对话方框内选择 X 轴:FL1-H1024;如果是双标,Y 轴选择:FL2-H1024(根据实验检测样品确定所选通道,本步骤选 FL1/FL2 来说明),如果是单标,Y 轴选择:SSC-H。点击 OK,FL1/FL2 的散点图出现。完成后可将重制图移至原图右方。untitlediPl 曰X:Y:|title三 El 吕X:Y:|liiT说明:散点图(Dotplot),又称二维散点图是流式分析最常用图谱,它可以显示两个独立参数的相互关系。在图中,横坐标 X 轴和纵坐标 Y 轴参数分别设为 FSC-H1024、SSC-H1024;双荧光标记时,第二图 X 和 Y 轴参数分别设为 FL1-H1024、FL2-H1024,X 轴为为荧光 1 强度的相对值,单位是道数,Y 轴则通常表示荧光 2 或光散射强度的相对值。仪器使用者可因实验需求来修改所有图谱中显示之参数。修改动作为轻击图谱上 X 和 Y 轴参数,并依需要选择之(FSC:细胞大小,SSC:细胞折射率,FL1:FITC 绿色荧光,FL2:PE 橙色荧光,FL3:PerCP 红色荧光)。5)在工具板中选择四象限工具,在 FL1/FL2 散点图上拖动Quadrant 的中心将它设定在(x,y)=(101,101)处,这些象限将指定阴性/阳性区域。6)从工具板中点击直方图图示,在...