课时跟踪检测十三 多聚酶链式反应扩增 DNA 片段(满分 50 分 时间 25 分钟)一、选择题(每题 3 分,共 24 分)1.下列有关 PCR 技术的论述,不对的的是( )A.PCR 技术运用的是碱基互补配对原则B.PCR 技术可用于基因诊断,判断亲缘关系等C.PCR 技术需在体内进行D.PCR 技术可分为变性、复性、延伸三个阶段解析:选 C PCR 技术是聚合酶链式反应的简称,是在体外迅速大量复制 DNA 片段的一种新技术。2.PCR 一般要通过三十多次循环,从第二轮循环开始,上一次循环的产物也作为模板参与反应,由引物Ⅰ延伸而成的 DNA 单链作模板时将( )A.仍与引物Ⅰ结合进行 DNA 子链的延伸B.与引物Ⅱ结合进行 DNA 子链的延伸C.同步与引物Ⅰ和引物Ⅱ结合进行子链延伸D.无需与引物结合,在酶的作用下从头合成子链解析:选 B 当由引物Ⅰ延伸而成的 DNA 单链作模板时,此单链引物端为 5′端,因此与它互补的子链应从另一端开始合成,即与引物Ⅱ结合延伸 DNA 的子链。3.在 PCR 扩增试验中,引物是很重要的。下列属于引物特点的是( )① 引物长度一般是 80~100 个碱基对(bp)为宜②DNA 聚合酶能从引物的 5′端开始延伸 DNA 链③ 引物是一小段 DNA 或 RNA④ 引物能与 DNA 母链的一段碱基序列互补配对A.①② B.③④C.①③ D.②④解析:选 B 引物长度一般以 20~30 个碱基对(bp)为宜,包括引物Ⅰ和引物Ⅱ两种。引物太短或太长,都也许减少产物的特异性。引物是一小段 DNA 或 RNA,它能与 DNA 母链的一段碱基序列互补配对;DNA 聚合酶不能从头开始合成 DNA,只能从 3′端延伸DNA 链,当引物与 DNA 母链结合后,DNA 聚合酶就能从引物的 3′端开始延伸 DNA 链。4.在 PCR 扩增 DNA 的试验中,根据设计,一分子 DNA 经 30 次循环后,应得到约230个 DNA 分子,但成果只有约 210个 DNA 分子。出现该现象的原因也许是( )① 循环次数不够②Taq DNA 聚合酶活力不够或其活性受到克制③ 引物不能与母链结合④ 系统设计欠妥A.①②③ D.①②④C.①③④ D.②③④解析:选 B 解答本题应从 PCR 扩增过程的条件进行分析:① 循环次数过少,产物的量比预期的少;②Taq DNA 聚合酶活力不够或其活性受到克制,导致催化效率减少,得到的产物比预期的少;③ 假如引物设计不合理,则无法进行扩增;④PCR 系统设置不妥,达不到预期的效果。5.下列有关 PCR 技术的论述,不对...