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微生物的实验室培养——总结

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微生物的实验室培育一、培育基:1、化学成分(1)一般成分:水 、 无机盐 、 碳源 、 氮源 。碳源:能为微生物的代谢提供碳元素的物质。无机碳源:CO2、NaHCO3 有机碳源:糖类、石油、花生粉饼等异养微生物只能利用有机碳源,同时其又是能源。单质碳不能作为碳源。(2)特别营养物质(生长因子):如,培育乳酸杆菌时需要在培育基中添加维生素2、制备:(1)方法步骤:计算、称量、溶化、(调节 PH)、灭菌、倒平板(2)灭菌方法:高压蒸汽灭菌法(高压蒸汽灭菌锅、一般压力 100KPa,温度 121℃,使用时应注意将锅内的冷空气排除洁净,否则达不到预订的温度)(3)关于倒平板:a 需要冷却到 50℃左右时(即不烫手),才能用来倒平板。b 整个过程在酒精灯火焰旁进行.c 要使锥形瓶的瓶口通过火焰,通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培育基。d 平板冷凝后,为什么要将平板倒置原因:平板冷凝后,皿盖上会凝聚水珠 ,将平板倒置,既可以防止培育基表面的水分过度地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培育基,造成污染.e 在倒平板的过程中,假如不小心将培育基溅在皿盖与皿底之间的部位 ,空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培育基上滋生,因此最好不要用这个平板培育微生物.(4)制备成功的标准:未接种的培育基在恒箱中保留 1—-2 天,无菌落生长。3、种类(1)根据物理性质可分为液体培育基 半固体培育基和固体培育基.液体体培育基应用于工业或生活生产,固体培育基应用于微生物的分离和鉴定,半固体培育基则常用于观察微生物的运动及菌种保藏等.(2)根据培育基的用途,可将培育基分为选择培育基和鉴定培育基。注意:(1)对于异养微生物来说含 C、H、O、N 的有机物即是碳源又是氮源和能源。(2)NH3 可做氮源又可作为某些微生物(如硝化细菌)的能源(3)CO(NH2)2 是氮源但不是碳源二、无菌技术(1)获得纯净培育物的关键是防止外来杂菌的入侵(2)目的:用来防止实验室的培育物被其他外来微生物污染外,有效避开操作者自身被微生物感染。(3)消毒与灭菌三、微生物的分离纯化培育技术1、目的:关键步骤是接种2、培育基为固体培育基,因为菌落只能在固体培育基上形成。3、方法:用平板划线法和稀释涂布平板法接种的目的是:使聚集在一起的微生物分散成单个细胞,从而能在培育基表面形成单个的菌落,以便于纯化菌种。(1)平板划线法:原理、优缺点注意:a 不同阶段灼烧接种环的目的:操作的第一步灼烧接种环是为了避开接种环上可能存在...

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