微生物的实验室培育一、培育基:1、化学成分(1)一般成分:水 、 无机盐 、 碳源 、 氮源
碳源:能为微生物的代谢提供碳元素的物质
无机碳源:CO2、NaHCO3 有机碳源:糖类、石油、花生粉饼等异养微生物只能利用有机碳源,同时其又是能源
单质碳不能作为碳源
(2)特别营养物质(生长因子):如,培育乳酸杆菌时需要在培育基中添加维生素2、制备:(1)方法步骤:计算、称量、溶化、(调节 PH)、灭菌、倒平板(2)灭菌方法:高压蒸汽灭菌法(高压蒸汽灭菌锅、一般压力 100KPa,温度 121℃,使用时应注意将锅内的冷空气排除洁净,否则达不到预订的温度)(3)关于倒平板:a 需要冷却到 50℃左右时(即不烫手),才能用来倒平板
b 整个过程在酒精灯火焰旁进行
c 要使锥形瓶的瓶口通过火焰,通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培育基
d 平板冷凝后,为什么要将平板倒置原因:平板冷凝后,皿盖上会凝聚水珠 ,将平板倒置,既可以防止培育基表面的水分过度地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培育基,造成污染
e 在倒平板的过程中,假如不小心将培育基溅在皿盖与皿底之间的部位 ,空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培育基上滋生,因此最好不要用这个平板培育微生物
(4)制备成功的标准:未接种的培育基在恒箱中保留 1—-2 天,无菌落生长
3、种类(1)根据物理性质可分为液体培育基 半固体培育基和固体培育基
液体体培育基应用于工业或生活生产,固体培育基应用于微生物的分离和鉴定,半固体培育基则常用于观察微生物的运动及菌种保藏等
(2)根据培育基的用途,可将培育基分为选择培育基和鉴定培育基
注意:(1)对于异养微生物来说含 C、H、O、N 的有机物即是碳源又是氮源和能源
(2)NH3 可做氮源又可作为某些微生物(如硝化细菌)的能源(3)CO(NH2)2 是氮源但不是碳源二、无菌技术(1)获得纯净培育物的关