维生素 C 含量测定的实验设计方案一、目的与要求(1)掌握维生素 C 的含量测定的原理和操作
(2)掌握维生素 C 的分子式和结构简式,了解维生素 C 的还原性
(3)掌握紫外分光光度法维生素 C 含量的测定的方法
(4)熟悉精密紫外可见分光光度计的使用方法
(5)掌握用标准曲线法进行定量分析的原理和方法
二、方法提要 维生素 C(Vitamin C ,Ascorbic Acid)广泛存在于新奇水果中,它具有保持肌肤润滑、防止衰老、抗坏血酸等作用,是人体必需的主要维生素之一,是人体正常生理代谢不可缺少的一类有机物[1]
维生素 C 在水果中主要以还原型(ASA)存在
维生素C又名抗坏血酸是一种含有 6 个碳原子的酸性多羟基化合物,分子式为 C6H8O6,分子量为 176
能溶于水、乙醇和甲醇,而不溶于其他有机溶剂,具有酸性和还原性,有 4 种异构体,即 L-抗坏血酸、D—抗坏血酸、L-异抗坏血酸、D-异抗坏血酸
天然抗坏血酸主要以 L—抗坏血酸为主,其效力最高
抗坏血酸在合适的条件下,可氧化成脱氢抗坏血酸,脱氢后的 L-脱氢抗坏血酸在生物体内可还原为 L—抗坏血酸,且这种变化是可逆的,故仍有生物活性
脱氢抗坏血酸可进一步被氧化,生成二酮古洛糖酸,而这一过程是不可逆的
在许多水果和蔬菜中,维生素 C主要以还原型抗坏血酸存在
维生素 C 的固体较稳定,水溶性最容易受氧化,所以测定 VC的准确性很大程度上取决于分析技术
水果中 VC 含量的测定一般采纳 2,6—-二氯靛酚滴定法[2]、碘量法[3]、2,4—二硝基苯肼法[4]、荧光分光光度法[5]高效液相色谱法[6]和点位滴定法[7]等,这些方法都有所用试剂不稳、操作程序复杂、费时等缺点,为此,此实验采纳分光光度法[8],首先测定维生素 C 的标准曲线,以吸光度差值△A 对抗坏血酸浓度 C 绘制标准曲线,以此为基础测定样品的