1宝草锦(Haworthia cymbiformis var. triebnet poelln)组培继代培养的激素优化研究1 前言植物组织培养(Plant Tissue Culture)是 20 世纪初,以植物生理学为基础发展起来的一门新兴技术,它是指在组织器官或细胞等离体的条件下利用人工培养基进行培养,使其形成完整植株 [1, 2]。其中包括器官培养、茎尖分生组织培养、细胞培养、原生质体培养和愈伤组织培养等。但是愈伤组织培养最为常见。一般类型都要经历愈伤组织阶段才能形成完整植株,茎尖分生组织培养和少数器官培养除外。植物组织培养的原理是利用细胞的全能型,即指一个完整的植物细胞拥有形成一个完整植株所必须的全部信息。利用这一个特性使植物成熟细胞经历脱分化之后形成愈伤组织再经由再分化形成完整的植株[3]。植物组织培养这项技术已经成为举世瞩目的生物技术之一。经过几十年的发展在医学、农业、工业和林业中得到广泛应用,尤其是在新品种培育、快速繁殖、植物次生代谢产物和苗木脱毒等生产方面发挥着巨大作用,并创造了巨大的经济效益[4]。1.1 植物组织培养外植体的选用和消毒选择合适的外植体是组织培养工作中的第一步,其种类的选择直接影响组织培养的效果。外植体选择时需要考虑培养目的、外植体的培养能力及取材是否会对母株造成影响等因素。芽、叶片和花径都可以作为多肉植物的外植体诱导再生植株,然而各有各的缺点。因此,多肉植物最适外植体的选择还要根据多肉种类和实际情况而定。外植体消毒灭菌是植物组培重中之重。它既要消除微生物又不能破坏织物表面细胞及组织。往往消毒灭菌是非常严谨的,要根据其生长环境、取材位置、取材时间等等来确定消毒剂和消毒时间。常用的消毒剂有:乙醇、升汞(或二氯化汞)、次氯酸盐等[5]。那淑芝[6]用 75%的酒精溶液浸泡 15s, 然后用 0.1%Hg Cl2溶液灭菌 5 min,来给库拉索芦荟灭菌。赵娟[7]等用 70%酒精消毒 30s, 0.1%Hg Cl2灭菌 15 min,来给褐斑伽蓝叶片灭菌。宋扬[8]采用75%酒精处理冰灯玉露幼嫩花茎 10 s, 再用 0.1%升汞消毒 7 min。目前, 多肉植物外植体消毒比较常用的方法是 70%~75%的酒精与 0.1%的氯化汞以不同时间的组合对外植体进行消毒。1.2 植物组织培养培养基和培养方式的选用1.2.1 培养方式的选用植物组织培养有半固体培养,固体培养和液体培养 3 种培养方法。最常用的还是固体培养[9],2其中百合科植物美丽豹子花[10]、虎眼万年青[11]、延龄草[12]、虎尾兰[13]、长蕊万寿竹...