1摘要背景与目的ZIC1 基因和 Survivin 基因分别被认为是一个潜在的抑癌基因和促癌基因，并在乳腺恶性肿瘤的发生、发展中起到了重要的作用。本研究旨在进一步确认 ZIC1基因在乳腺癌中的作用，分析 ZIC1 基因与 Survivin 基因在乳腺癌中的表达水平相关性，并探索与 ZIC1 基因相关的分子机制。方法（1）收集 120 例在 2014 年-2015 年间于上海长海医院行乳腺癌根治术的浸润性乳腺癌患者，应用免疫组织化学技术检测乳腺癌组织及对应的癌旁组织中 ZIC1蛋白和 Survivin 蛋白的表达水平，并分析癌组织中两种表达的相关性；（2）选取六种人乳腺癌细胞株（MCF-7，MDA-MB-231，MDA-MB-453，SK-BR3，BT-474 和 BT-549），和一种人正常乳腺上皮细胞株 MCF-10A，常规培养后，提取总蛋白，进行 western blotting 技术检测 ZIC1 蛋白与 Survivin 蛋白的表达情况，并筛选合适的乳腺癌细胞株用于后续实验；（3）应用 rLV-ZsGreen-PGK-Puro 和 rLV-Zic1-PGK-Puro 慢病毒颗粒进行细胞转染，嘌呤霉素筛选细胞后，稳定培养，并应用荧光显微镜及 western blotting 技术检测 ZIC1 蛋白转染效率及 Survivin 蛋白的表达情况；（4）应用 MTT 法检测稳定转染 rLV-ZsGreen-PGK-Puro 或 rLV-Zic1-PGK-Puro慢病毒颗粒的 MDA-MB-231 和 SK-BR3 乳腺癌细胞增殖能力；（5）应用平板克隆试验检测转染 rLV-ZsGreen-PGK-Puro 或 rLV-Zic1-PGK-Puro慢病毒颗粒的 MDA-MB-231 和 SK-BR3 乳腺癌细胞克隆形成能力；（6）应用流式细胞术检测转染 rLV-ZsGreen-PGK-Puro 或 rLV-Zic1-PGK-Puro 慢病毒颗粒的 MDA-MB-231 和 SK-BR3 乳腺癌细胞细胞周期分布情况；（7）应用流式细胞术检测转染 rLV-ZsGreen-PGK-Puro 或 rLV-Zic1-PGK-Puro 慢病毒颗粒的 MDA-MB-231 和 SK-BR3 乳腺癌细胞细胞凋亡情况；（8）利用 Minute™Mitochondria Isolation Kit 提取转染 rLV-ZsGreen-PGK-Puro或 rLV-Zic1-PGK-Puro 慢病毒颗粒的 MDA-MB-231 和 SK-BR3 乳腺癌细胞内线粒体及胞浆蛋白；（9）利用 JC-1 试剂盒检测转染 rLV-ZsGreen-PGK-Puro 或 rLV-Zic1-PGK-Puro 慢病毒颗粒的 MDA-MB-231 和 SK-BR3 乳腺癌细胞的纯化的线粒体膜电位水平；（10）应用 western blotting 技术检测转染 rLV-ZsGreen-PGK-Puro 或 rLV-Zic1-PGK-Puro 慢病毒颗粒的 MDA-MB-231 和 SK-BR3 乳腺癌细胞内 Akt 以及线粒体凋亡途...
