扇贝多肽对人脐血干细胞体外分化的影响【摘要】 ［目的］观察扇贝多肽(polypeptides from chlamys farreri，PCF)对人脐血干细胞(human umbilical cord blood cells，HUCBCs)中的酪氨酸蛋白酶(PTKs)活性的影响。［方法］取新奇人脐血干细胞原代培育，贴壁 2 d 后，分别用 1∶1 600、1∶3 200、1∶6 400、1∶12 800 稀释的扇贝多肽液 37℃继续培育，至第 24、48、72、96 h 收集细胞，进行形态学观察；以神经营养因子(NGF)作为阳性对比；以 DMEM 作阴性对比。使用［1y-32p］ATP 掺入，液闪计数法测定酪氨酸蛋白激酶(PTK)活性。［结果］阴性对比组 HUCBCs 的 PTK 无活性，阳性对比组 PTK活性升高。PCF 组 48 h PTK 活性升高()，随后逐渐降低，至 96 h PTK 无活性。［结论］扇贝多肽液具促进人脐血干细胞分化的功能。【关键词】 人脐血干细胞； 贝多肽； PTKs 近年来，人脐血干细胞(human umbilical cord blood cells，HUCBCs)应用于脊髓损伤的细胞移植讨论较多［1］。在自然条件下 HUCBCs 自身的再生能力弱，然而在某些因子的刺激下其生长可明显加快［2］。酪氨酸蛋白激酶(PTKs)广泛存在于各种细胞内［3］，是细胞分化信号传导途径的一种关键性物质，来源于细胞外的信号通过该酶将信息传入细胞核内，并启动细胞向成熟方向分化［4］。本文观察了中药扇贝多肽(polypeptides from chlamys farreri，PCF)对体外培育的HUCBCs PTKs 活性的影响。 1 材料与方法 制备脐血单个核细胞(mononuclear cell，MNC)悬液,参照 Ha 等人［1］方法采集脐血单个核细胞，以 1×106／ml 的细胞密度接种于含 DMEM／F １２ 10 ml 的培育皿中原代培育，贴壁 2 d 后将更换含不同药物的培育液。 PCF 液对 HUCBCs 生长的影响PCF 液(中国水产科学院黄海水产讨论所提供，生药含量 2 g／ml)按 1∶1 600、1∶3 200、1∶6 400、1∶12 800 稀释；NGF(第二军医大学生物制品检测中心研制，批号：960510，5 000 μ／支)按 1∶15000 稀释，作为阳性对比， DMEM 作阴性对比。原代培育 HUCBCs 贴壁 2 d 后，将 37℃培育，平行样 3 个。分别于培育后第 24、28、72、96 h 收集细胞，进行形态学观察和 PTK 测定。 PTKs 活性检测使用［1y-32p］ATP 掺入，液闪计数法观察各组 HUCBCs PTK 活性的变化。PTK 测试系统(美国 Gibco 公司产品，NO：13154-018)。按试剂系统推举配方配制抽提...
