抗体芯片技术的应用探讨 抗体芯片，是蛋白质芯片的一种，是检测生物样品中蛋白表达模式的新方法。这种新技术可以在一次实验中比较生物样品中成百上千的蛋白质的相对丰度，将极大促进蛋白质组目前的讨论状况。抗体芯片可以分析样品之间的差异；确定相应蛋白质的性质；分析细胞提取物或者血清蛋白质混合物；还可以进行生物化学平行分析；检测蛋白表达水平变化。抗体芯片虽然进展的时间比较短，但是进展迅速，在多个领域中得到了较好的运用。本文将从作从抗体芯片的分类、支持介质、检测方法、优缺点和应用等方面对抗体芯片进行初步探讨[1]。 1 抗体芯片的形式和分类 根据芯片制作工艺的不同，主要有平板芯片、微孔芯片(microwell arrays)、微流芯片(microfluidic array)，也包括表面增强激光解离/离子化芯片、SPR 芯片和磁珠为基础的芯片。 1．1 平板芯片 早期的蛋白芯片大都将蛋白质直接点样在硝酸纤维素膜或者玻片上，芯片密度低，如普通蛋白芯片系统，Wildt 等 使用自动化的机械手挑取重组抗体库的单菌落,在 22 cm×22 cm 的滤膜上点 18342 个不同重组抗体 scFv 克隆的芯片,制成第一个高密度抗体芯片，对 15 种抗原同时进行筛选。 1．2 微孔芯片 Biran、Walt 通过蚀刻纤维制造了直径为 2．5 mm，深度 5 um 的微孔芯片，能够检测携带报告基因或者荧光指示剂的单个细胞。微孔芯片能够将反应局限化，不仅减少样品的用量，而且可以减少邻近微孔之间液滴的相互流动。 1．3 微流路芯片 微流路芯片由通过管道连接微孔组成，允许在微型化的形式下处理液体，通过蛋白激酶 A 的变化来监测蛋白质的磷酸化水平。尽管微流路芯片处于进展早期阶段，但是 Agilent Technologies 公司提供 Lab-on-a-Chip 产品可以在芯片上分析DNA、RNA、蛋白质和细胞。 1．4 其他芯片 除了以上的芯片形式。还有 SELDI 芯片，表面质子共振(SPR)芯片，以及以磁珠为基础的芯片。 2 抗体芯片的支持介质 抗体芯片表面有多种支持介质包括玻璃、塑料、多孔胶片、滤膜和微孔。固相支持介质对芯片质量有着重要的影响。 2．1 聚苯乙烯和滤膜 将通常在 96 孔板上进行的生物化学和免疫学分析微型化的夹心法芯片系统是比较常用的芯片形式。Wiese 使用同样形式的芯片测定人血清中的前列腺特异性抗原。在芯片表面进行 ELISA反应已经显示出与传统 ELISA 具有同样的敏感性和特异性，但是捕获抗体的用量不到 1/100。...
