交叉配血试验标准操作章程(微柱凝胶抗人球蛋白法)1
目的为了进一步法律规范微柱凝胶抗人球蛋白法在交叉配血试验中的应用,保证检测结果准确及临床输血安全有效,依据《输血实验室管理程序》的要求制定本规程
适用范围适用于医疗机构输血科作交叉配血试验
职责医疗机构输血科技术人员负责对交叉配血的试验
原理红细胞血型抗原与不完全抗体(IgG),在抗人球蛋白的桥梁作用下,经一定的离心力,产生特异性免疫凝集复合物或红细胞血型抗原与完全抗体(IgM)直接产生的特异性免疫凝集复合物,被排阻在具备三维空间网状结构的凝胶表层或凝胶颗粒间隙之中,判为阳性结果,表示待检血标本中含有相应红细胞血型抗原抗体;红细胞全部沉积于凝胶孔腔底部,即推断为阴性反应,表示待检血标本中无相应的红细胞血型抗原抗体
所需设备和试剂 普通离心机、微注凝胶卡专用离心机、微柱凝胶卡专用孵育器、微量移液器、抗人球蛋白微柱凝胶卡 6
检测环境条件室湿应控制在 18~27℃,湿度应当保持 30%~70%
1 先将供(受)血标本制备 0
5%红细胞低离子介质(LIM)悬液
2 撕开卡的封膜,于反应胶中主(次)侧管加供(受)者 0
5% 红细胞 LIM 悬液 100μl,加入受(供)血者血浆或血清 25μl(或 50μl)
3 将检测卡 37℃孵育 15min 取出,置离心机 1800r/min 离心 1min,2500r/min 离心 1min
4 取出,判定结果,结果判定标准按下表:(可参考结果判定示图)阳性4+表示 RBC 绝大部份凝聚于凝胶表层3+表示 RBC 多数凝聚于凝胶表层,少数 RBC 凝集颗粒悬浮于近胶表层2+表示部份 RBC 沉积于胶底,部分 RBC 凝集颗粒悬浮于凝胶中1+表示 RBC 多数沉积于胶底,可见少数 RBC 凝集颗粒悬浮于凝胶中±表示 RBC 绝大多