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齐鲁医学人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白NGAL酶联免疫分析

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人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供讨论使用。检测范围:96T0.2μg/L -8μg/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)水平。用纯化的人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL),再与HRP 标记的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)浓度。 试剂盒组成 130 倍浓缩洗涤液20ml×1 瓶7终止液6ml×1 瓶2酶标试剂6ml×1 瓶8标准品(16μg/L)0.5ml×1 瓶3酶标包被板12 孔×8 条9标准品稀释液1.5ml×1 瓶4样品稀释液6ml×1 瓶10说明书1 份5显色剂 A 液6ml×1 瓶11封板膜2 张6显色剂 B 液6ml×1/瓶12密封袋1 个标本要求 1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避开反复冻融2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可根据下列图表在小试管中进行稀释。8μg/L5 号标准品150μl 的原倍标准品加入 150μl 标准品稀释液4μg/L4 号标准品150μl 的 5 号标准品加入 150μl 标准品稀释液2μg/L3 号标准品150μl 的 4 号标准品加入 150μl 标准品稀释液1μg/L2 号标准品150μl 的 3 号标准品加入 150μl 标准品稀释液0.5μg/L1 号标准品150μl 的 2 号标准品加入 150μl 标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对比孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl,待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl(样品最终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3....

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