凝聚胺交叉配血标准操作章程一、目的:为了进一步法律规范交叉配血试验的技术操作,保证临床输血安全有效,特制定本规程。二、适用范围适用于输血科进行交叉配血试验三、职责输血科技术人员负责交叉配血试验。四、测定原理:红细胞表面带有大量的负电荷,凝聚胺是一种高效价阳离子季胺盐多聚物,溶解后产生较多正电荷,可以中和红细胞表面的唾液酸带有的负电荷,使红细胞之间的距离减少。若是未被抗体致敏的红细胞,加入悬浮液它具备中和凝聚胺的作用,使正常的红细胞非特异性凝集散开,试验结果为阴性;但假如红细胞被相应的抗体所致敏,则会被凝聚胺凝集,凝块就不会散开,试验结果为阳性。五、试剂及材料(一)聚凝胺试剂盒(合肥天一生物技术讨论所)成分:低离子介质溶液、聚凝胺溶液、重悬液、阴性及阳性对比液;保存条件:2~8℃贮存 2 年,试剂盒打开使用后可置于室温(二)材料:玻璃试管、微量移液器、离心机、载玻片、显微镜等六、标本要求:(一)抽取受血者抗凝(抗凝剂为 EDTA.K2)静脉血 2-3ml(注意核对病人信息), 在 3000r/min 条件下离心 5 分钟备用。(二)标本保存:血液样本必须密封,2~8℃保存 7 天。(三)用于交叉配血必须是 2~8℃保存 3 天以内的标本。七、操作程序:(一)将受血者红细胞配成 3%盐水悬液,鉴定 ABO 血型及 Rh 血型。(二)将供血者血样配制 3%红细胞悬液,鉴定 ABO 血型及 Rh 血型。(三)取干净小试管 2 支,1 支标明受血者血清(PS)+供血者细胞(DC)或“主侧”;另 1 支标明供血者血清(DS)+受血者细胞(PC)或“次侧”。(四)主侧管:受血者血清 100ul+供血者红细胞悬液 50ul。次侧管:供血者血清 100ul+受血者红细胞悬液 50ul。各加低离子介质溶液 0.6 ml,混匀后静置 1 分钟,再各加聚凝胺溶液 2 滴,静置 15s。(五) 混合均匀后,在 1000g 条件下离心 15s,然后倒掉上清液。(六) 轻轻侧动试管里的细胞扣,目测红细胞有无凝集,如无凝集,则必须重做。(七) 最后加入重悬液 2 滴,轻轻转动试管混合,并同时观察结果,必要时在显微镜下观察结果。八、结果判定:(一)阴性:60 秒内凝块散开,代表由聚凝胺溶液引起的非特异性凝集,配血结果相合。(二)阳性:60 秒内凝块不散开,代表红细胞抗原抗体结合的特异性反应,配血结果不相合。(三)如反应可疑,可进一步倒在玻片上用显微镜观察。九、注意事项:(一)若病人血浆(血清)含肝素,须多加双倍量的聚凝胺溶液以中和肝...