凝聚胺交叉配血标准操作章程一、目的:为了进一步法律规范交叉配血试验的技术操作,保证临床输血安全有效,特制定本规程
二、适用范围适用于输血科进行交叉配血试验三、职责输血科技术人员负责交叉配血试验
四、测定原理:红细胞表面带有大量的负电荷,凝聚胺是一种高效价阳离子季胺盐多聚物,溶解后产生较多正电荷,可以中和红细胞表面的唾液酸带有的负电荷,使红细胞之间的距离减少
若是未被抗体致敏的红细胞,加入悬浮液它具备中和凝聚胺的作用,使正常的红细胞非特异性凝集散开,试验结果为阴性;但假如红细胞被相应的抗体所致敏,则会被凝聚胺凝集,凝块就不会散开,试验结果为阳性
五、试剂及材料(一)聚凝胺试剂盒(合肥天一生物技术讨论所)成分:低离子介质溶液、聚凝胺溶液、重悬液、阴性及阳性对比液;保存条件:2~8℃贮存 2 年,试剂盒打开使用后可置于室温(二)材料:玻璃试管、微量移液器、离心机、载玻片、显微镜等六、标本要求:(一)抽取受血者抗凝(抗凝剂为 EDTA
K2)静脉血 2-3ml(注意核对病人信息), 在 3000r/min 条件下离心 5 分钟备用
(二)标本保存:血液样本必须密封,2~8℃保存 7 天
(三)用于交叉配血必须是 2~8℃保存 3 天以内的标本
七、操作程序:(一)将受血者红细胞配成 3%盐水悬液,鉴定 ABO 血型及 Rh 血型
(二)将供血者血样配制 3%红细胞悬液,鉴定 ABO 血型及 Rh 血型
(三)取干净小试管 2 支,1 支标明受血者血清(PS)+供血者细胞(DC)或“主侧”;另 1 支标明供血者血清(DS)+受血者细胞(PC)或“次侧”
(四)主侧管:受血者血清 100ul+供血者红细胞悬液 50ul
次侧管:供血者血清 100ul+受血者红细胞悬液 50ul
各加低离子介质溶液 0
6 ml,混匀后静置 1 分钟,再各加聚凝胺溶液 2 滴,静置 15s
(五) 混合