2.细胞因子测定措施与应用测定措施:( 1 ) 生 物 学 检 测法:又称生物活性检测,是根据细胞因子特定的生物活性而设计的检测法。生物活性检测法又可分为:①细胞增殖法;②靶细胞杀伤法;③细胞因子诱导的产物分析法;④细胞病变克制法。( 2 ) 免 疫 学 检 测法:细胞因子均为蛋白或多肽,具有较强的抗原性。可运用抗原抗体特异性反应的特性,用免疫学技术定量检测细胞因子。常用的措施包括 ELISA、RIA 与免疫印迹法。(3)分子生物学措施:目前公认的细胞因子的基因均已克隆化,较容易地得到某一细胞因子 cDNA 探针或根据已知的核苷酸序列人工合成寡聚核苷酸探针。常使用斑点杂交、Northernblot、逆转录 PCR,细胞或组织原位杂交等。具有敏捷、迅速等长处,甚至从 l~10 个细胞中就可检出其中的特异 mRNA。临床应用:细胞因子测定可作为特定疾病诊断的辅助指标,用来评估机体的免疫状态、判断治疗与预后,用于临床治疗应用时的监测等。(十六)细胞黏附分子的测定技术同学们应重点掌握:1.细胞表面黏附分子的测定:2.可溶性黏附因子的测定:3.理解临床应用白细胞和血管皮细胞、巨噬细胞和上皮细胞等以与血液中均存在细胞粘附分子。按其构造特点,分有钙离子依赖性家族、整合素家族、免疫球蛋白超家族和选择素家族四大类。1.细胞表面粘附分子的检测(1)放射免疫测定法:一般用抗细胞粘附分子抗体包被载体,加受检样品后,继加对应单克隆抗体和同位素标识的二抗作非竞争性固相放射免疫测定法。(2)荧光免疫测定法:用不一样激发波长的荧光素着染色受检细胞,在 FACS 仪上可同步检测有两种不一样的细胞粘附分子。(3)酶免疫测定法:重要为双抗体夹心 ELISA,本法应用最广,但仅能检出一群细胞的表面粘附分子数量,而不能反应单个细胞粘附分子数量的变化。(4)其他措施:如酶免疫组织化学测定、流式细胞仪分析、时间辨别荧光免疫测定等。例题:如下哪一种测定措施不属于细胞表面黏附分子的检测措施:A.酶免疫测定法B.放射免疫测定法C.流式细胞仪分析D.PCRE.荧光免疫测定法答案:D2 . 可 溶 性 粘 附 分 子 的 检测:多采用双抗体夹心 ELISA,研究最多的选择素家族和免疫球蛋白超家族。前者有 E、L、P 三型,均可见血液中。对于 P、L、E 选择素在临床中的应用也需要掌握,哪些疾病出现这三种选择素升高现象。3.临床应用:理解。(十七)免疫球蛋白检测与应用同学们应重点掌握:1.纯熟掌握免...