苏教版生物选修 3 所有重要知识点选修 3《现代生物科技专题》知识点总结 专题 1 基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外 DNA 重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，发明出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在 DNA 分子水平上进行设计和施工的，又叫做 DNA 重组技术。（一）基因工程的基本工具1.“”——分子手术刀限制性核酸内切酶（1）来源：重要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：可以识别双链 DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）成果：经限制酶切割产生的 DNA 片段末端一般有两种形式：黏性末端和平末端。2.“”——分子缝合针DNA 连接酶(2)与 DNA 聚合酶作用的异同: DNA 聚合酶只能将单个核苷酸加到已经有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA 连接酶是连接两个 DNA 片段的末端，形成磷酸二酯键。3.“”——分子运送车载体（1）载体具有的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保留。② 具有一至多种限制酶切点，供外源 DNA 片段插入。③ 具有标识基因，供重组 DNA 的鉴定和选择。标识基因的作用：是为了鉴定受体细胞中与否具有目的基因，从而将具有目的基因的细胞筛选出来。常用的标识基因是抗生素基因。（2）最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、构造简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状 DNA 分子。（3）其他载体：λ 噬菌体的衍生物、动植物病毒 (二)基因工程的基本操作程序第一步：获得目的基因2.对于序列已知的目的基因应当使用化学合成法合成，PCR(DNA 聚合酶链式反应)扩增，若序列未知，可以建立一种包括目的基因在内的基因文库，从中找到我们研究所需的目的基因。第二步：形成重组 DNA 分子第三步：将重组 DNA 分子导入受体细胞2.常用的转化措施：将目的基因导入植物细胞：采用最多的措施是 农杆菌转化法和 基因枪法将目的基因导入动物细胞：最常用的措施是 显微注射技术。措施的受体细胞多是 受精卵。将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是 繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少 ，最常用的原核细胞是 大肠杆菌 ，其转化措施是：先用 CaCl2 处理大肠杆菌，增强大肠杆菌细胞壁的通透性，使具有目的基因的重组质粒进入大肠杆菌宿主细胞。第四步：筛选具有目的基因的受体细胞.重组...
