2025年生物化学实验知识点整理

生物化学试验知识点整理试验一 还原糖的测定、试验二 粮食中总糖含量的测定1.还原糖测定的原理3,5-二硝基水杨酸与还原糖溶液共热后被还原成棕色的氨基化合物,在 550nm 处测定光的吸取增长量，得出该溶液的浓度，从而计算得到还原糖的含量2.总糖测定原理多糖为非还原糖，可用酸将多糖和寡糖水解成具有还原性的单糖，在运用还原糖的性质进行测定，这样就可以分别求出总糖和还原糖的含量3.电子天平使用4.冷凝回流的作用：使 HCl 冷凝回流至锥形瓶中，防止 HCl 挥发，从而减少 HCl 的浓度。5.多糖水解措施：加酸进行水解6.怎样检查淀粉都已经水解：加入 1-2 滴碘液，假如立即变蓝则阐明没有完全水解，反之，则阐明已经完全水解。7.各支试管中溶液的浓度计算8.NaOH 用量： 9.不能中途换分光光度计,由于不一样的分光光度计的光源发光强度不一样10.分光光度计的原理：在一般状况下，原子处在基态，当通过基态原子的某辐射线所具有的能量（或频率）恰好符合该原子从基态跃迁到激发态所需的能量（或频率）时，该基态原子就会从入射辐射中吸取能量，产生原子吸取光谱。原子的能级是量子化的，因此原 子 对 不 一 样 频 率 辐 射 的 吸 取 也 是 有 选 择 的 。 这 种 选 择 吸 取 的 定 量 关 系 服 从 式。试验证明，在一定浓度范围内，物质的吸光度 A 与吸光样品的浓度 c 及厚度 L 的乘积成正比，这就是光的吸取定律，也称为郎伯-比尔定律分光光度计就是以郎伯比尔定律为原理，来测定浓度11.为何要水解多糖才能用 DNS由于 DNS 只能与还原糖溶液在加热的条件下反应生成棕红色的氨基化合物，不能与没有还原性的多糖反应。12.为何要乘以 0.9由于淀粉的水解方程式为，只有用还原糖的含量乘以 0.9 才能得到多糖的含量。13.为何要中和后再测？由于 DNS 要在中性或微碱性的环境下与葡萄糖反应试验三 蛋白质的水解和纸色谱法分离氨基酸、试验四 考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度1.纸色谱分离氨基酸分离原理由于各氨基酸在固定相（水）和流动相（有机溶剂）中的分派系数不一样，从而移动速度不一样，通过一段时间后，不一样的氨基酸将存在于不一样的部位，达到分离的目的。2.天然氨基酸为 L 型3.酸式水解的长处是：是保持氨基酸的旋光性不变，本来是 L 型，水解后还是 L型，由于甘氨酸所有的 R 基团是氢原子，因此它不是 L 型5.酵母粉水解后绝对不具有色氨酸6.根据分离原理不一样分离色谱可分为...