专题 2 细胞工程 2.3 动物细胞工程知识点汇总1. 动物细胞培养（1）概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出有关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在合适的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。(2）动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养.（3)细胞贴壁和接触克制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁.细胞数目不停增多,当贴壁细胞分裂生长到表面互相克制时,细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触克制.（4）动物细胞培养需要满足如下条件① 无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。一般还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外,应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身导致危害.② 营养：合成培养基成分:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。一般需加入血清、血浆等天然成分。③ 温度:合适温度:哺乳动物多是 36。5+0.5℃℃；pH：7.2～7。4。④ 气体环境：95％空气+5％CO2。O2 是细胞代谢所必需的，CO2 的重要作用是维持培养液的 pH.（5）动物细胞培养技术的应用：制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质、培养医学研究的多种细胞。动物体细胞核移植技术和克隆动物(1）哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植（比较容易）和体细胞核移植（比较难）。（2）选用去核卵母细胞的原因：卵母细胞比较大，容易操作；卵母细胞细胞质多，营养丰富。（3）体细胞核移植的大体过程是:高产奶牛（提供体细胞）进行细胞培养；同步采集卵母细胞，在体外培养到减二分裂中期的卵母细胞，去核(显微操作)（注：为何要用卵细胞？它可以提供充足的营养；操作简便；细胞质能促使细胞核全能性的体现)；将供体细胞注入去核卵母细胞；通过电刺激使两细胞融合，供体核进入受体卵母细胞,构建重组胚胎；将胚胎移入受体(代孕)母牛体内；生出与供体奶牛遗传基因相似的犊牛.(4)体细胞核移植技术的应用：①加速家畜遗传改良进程，增进良畜群繁育;② 保护濒危物种，增大存活数量；③生产珍贵的医用蛋白；④作为异种移植的供体⑤用于组织器官的移植等。（5）体细胞核移植技术存在的问题：克隆动物存在着健康问题、体现出遗传和生理缺陷等。 去核卵母细胞；通过电刺激使两细胞融合，供体核进入受体卵...
