二 动物细胞工程教学目的动物细胞工程的主要技术——动物细胞培养、动物细胞融合和单克隆抗体(A:知道)。重点和难点单克隆抗体教学过程【板书】 动物细胞培养 动物细胞融合动物细胞工程 单克隆抗体的制备 单克隆抗体 单克隆抗体的应用【注解】一、动物细胞培养(一)培养液的成分:葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清(与植物组织培养基的区别) 取材:动物胚胎细胞或出生不久的幼龄动物的器官或组织 分离细胞 方法:用胰蛋白酶(二)过程 原代培养传代培养 10 代左右细胞株:40-50 代细胞系:无限传代(部分遗传物质发生了改变,具癌变特点)(三)应用:1. 生产有重要价值的蛋白质生物制品2. 培养用于移植的组织或器官3. 检测有毒物质4. 进行生理、病理研究,为治疗和预防疾病提供理论依据【例析】.在动物细胞培养过程中,出现遗传物质改变的细胞是(A)A.细胞系 B.细胞株 C.原代细胞 D.传代细胞.下列属于动物细胞培养与植物细胞培养区别的是(A)A.培养基成分不同B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行C.动物细胞可以传代培养,而植物细胞不能D.动物细胞能够大量培养,而植物细胞只能培养成植株二、动物细胞融合(一) 与植物体细胞杂交的比较1. 相同:动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是相同的,诱导融合的方法类似。(如都可用聚乙二醇 PEG)2. 不同(1)物体细胞杂交在植物原生质体融合后,还有把杂种体细胞培育成新个体这一步骤。而动物细胞融合则无这一步。(2)动物细胞融合常用灭活的病毒。(二)最重要的用途——制备单克隆抗体三、单克隆抗体(一)与血清抗体的区别单克隆抗体:由单个 B 细胞通过无性繁殖(克隆)形成细胞群,由它们产生出化学性质单一,特异性强的抗体。血清抗体:从动物血清中分离所得的抗体,产量低、特异性差、纯度低,反应不够灵敏。(二)制备小鼠脾脏 B 淋巴细胞+小鼠的骨髓瘤细胞(经过免疫、效应) 灭活病毒或 PEG(融合后有个筛选问题,剔除相同细胞的融合细胞) 具效应 B 淋巴细胞分泌特异性抗体的能力杂交瘤细胞 具骨髓瘤细胞在体外培养条件下大量增殖的能力挑选出能产生特定抗体的细胞群、继续培养(用选择培养基选出能产生单克隆抗体的) 体内或体外培养 单克隆抗体(三)应用1. 对理论研究有重要意义2. 实践中的应用:疾病的诊断、治疗和预防方面,与常规抗体相比,特异性强,灵敏度高,优越性非常明显。(治疗癌症的“生...