山西省太原市十六中 2014 年高三生物 5.2 PCR 技术教案 中图版版选修 1【教学目标】 1、了解 PCR 技术的基本操作2、理解 PCR 的原理3、讨论 PCR 的应用【重点难点】重点： PCR 的原理和 PCR 的基本操作难点： PCR 的原理读书指导法、启发式教学【教学流程】一、基础知识： 自主预习1．PCR 原理填写下列表格参与的组分在 DNA 复制中的作用解旋酶DNA 母链合成子链的原料DNA 聚合酶引物DNA 的两条链是反向平行的，通常将 DNA 的羟基末端称为 ，而磷酸基团的末端称为 。DNA 聚合酶不能 开始合成 DNA，而只能 ， 因 此 ， DNA复 制 需 要 引 物 。 DNA的 合 成 方 向 总 是 。在 DNA 的复制过程中，复制的前提是 。在体外可通过控制 来实现。在 的温度范围内，DNA 的双螺旋结构将解体，双链分开，这个过程称为 。PCR 利用了 DNA 的 教学随想原理，通过控制温度来控制双链的解聚与结合。由于 PCR 过程的温度高，导致DNA 聚合酶失活，后来 的 DNA 聚合酶的发现和应用，大大增加了 PCR 的效率。PCR 反 应 需 要 在 一 定 的 缓 冲 溶 液 中 提 供 ： ， ， ， ，同时通过控制温度使 DNA 复制在体外反复进行。2．PCR 的反应过程PCR 一般要经历 循环，每次循环可以分为 、 和 三步。从第二轮循环开始，上一次循环的产物也作为模板参与反应，并且由 延伸而成的 DNA 单链会与 结合，进行 DNA 的延伸，这样，DNA 聚合酶只能 ，使这段固定长度的序列成指数扩增。3．实验操作在实验室中，做 PCR 通常使用 ，它是一种薄壁塑料管。具体操作时，用微量移液器，按 PCR 反应体系的配方在 中依次加入各组分，，再参照下表的设置设计好 PCR 仪的循环程序即可。4．操作提示为避免外源 DNA 等因素的污染，PCR 实验中使用的 、 、 以及蒸馏水等在使用前必须进行 。PCR 所用的缓冲液和酶应分装成小份，并在 储存。使用前，将所需试剂从冰箱拿出，放在冰块上缓慢融化。在微量离心管中添加反应成分时，移液管上的枪头要 。【典例解析】例 1 在（ ）的温度范围内，DNA 的双螺旋结构解开A. 10－20℃ B. 80－100℃ C. 20－30℃ D. 40－60℃例 2 关于 DNA 的复制，下列叙述正确的是（ ）A.DNA 聚合酶不能从头开始合成 DNA，只能从 5’端延伸 DNA 链B.DNA 复制不需要引物C.引物与 DNA 母链通过碱基互补配对进行结合D.DNA ...
