江苏省盐城市时杨中学 2012-2013 学年高二下学期生物《基因工程-DNA 重组技术的基本工具》导学案 人教版编制：沈洪霞 审核： 批准： 【学习 目标】1、简述基因工程的概念含义。2、简述基因工程的原理。3、说出 DNA 重组技术的基本工具及其作用、特点。【问题情境】1、什么叫基因工程？2、基因工程的基本工具有哪些？3、限制性核酸内切酶切割的是 DNA 特定部位的 2 个核苷酸之间的氢键还是磷酸二酯键？4、最简单的质粒载体必须包括哪三个部分？【我的疑问】备 注 第 1 页共 4 页 1【自主探究】一、基因工程的概念和原理1、基因工程是在 水平上操作、改变生物遗传性状的技术，因此又叫做 。2、基因工程的原理是： 。二、基因工程的工具1、限制性核酸内切酶——“分子手术刀”（1）分布：微生物。（2）特点：一种限制酶只能识别一种特定的 ；并在特定部位的 2 个核苷酸之间的切开 键。例：EcoRI 只能识别 GAATTC 碱基序列，切割的是 G—A 之间的键。（4）DNA 分子经限制酶切割产生的 DNA 片段，末端通常有两种形式，即 和 。2、DNA 连接酶——“分子缝合针”（1）分类：一类是从大肠杆菌中分离得到的，称为DNA 连接酶。DNA 连接酶只能将 连接起来，不能将双链DNA 片段平口末端之间进行连接；另一类是从 T4噬菌体分离出来的，称为 T4DNA 连接酶。T4DNA 连接酶既可以“缝合”双链 DNA 片段互补的 ，又可以“缝合”双链 DNA 片段的 ，但连接 之间的效率比较低。（2）DNA 连接酶连接的是 键。3、载体——“分子运输车”（1）载体的作用：将切割下来的 导入受体细胞。（2）作为载体必须具备以下条件：①能够在宿主细胞中复制并稳定地保存；②具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接；③具有某些标记基因，便于进行筛选，如对抗生素的抗性基因。（3）目前通常使用的载体是 ，它是一种相对分子质量较小、独立于拟核 DNA 之外的环状 DNA 分子。其他载体还有 和 等。备 注第 2 页共 4 页 2【课堂检测】例 1、以下是两种限制酶切割后形成的 DNA 片段，分析回答问题。 (1)其中①和 是由一种限制酶切割形成的 末端，两者要重组成一个 DNA 分子，所用 DNA 连接酶通常是 。(2) 和 是由另一种限制酶切割形成的 末端，两者要形成重组 DNA 片段，所用 DNA 连接酶通常是 。 例 2、治疗糖尿病用的胰岛素，在过去主要是从动物(如猪、牛)体获得的。自 20 世纪 70 年代基...
