江苏省盐城市时杨中学 2012-2013 学年高二下学期生物《基因工程-DNA 重组技术的基本工具》导学案 人教版编制：沈洪霞 审核： 批准： 【学习 目标】1、简述基因工程的概念含义
2、简述基因工程的原理
3、说出 DNA 重组技术的基本工具及其作用、特点
【问题情境】1、什么叫基因工程
2、基因工程的基本工具有哪些
3、限制性核酸内切酶切割的是 DNA 特定部位的 2 个核苷酸之间的氢键还是磷酸二酯键
4、最简单的质粒载体必须包括哪三个部分
【我的疑问】备 注 第 1 页共 4 页 1【自主探究】一、基因工程的概念和原理1、基因工程是在 水平上操作、改变生物遗传性状的技术，因此又叫做
2、基因工程的原理是：
二、基因工程的工具1、限制性核酸内切酶——“分子手术刀”（1）分布：微生物
（2）特点：一种限制酶只能识别一种特定的 ；并在特定部位的 2 个核苷酸之间的切开 键
例：EcoRI 只能识别 GAATTC 碱基序列，切割的是 G—A 之间的键
（4）DNA 分子经限制酶切割产生的 DNA 片段，末端通常有两种形式，即 和
2、DNA 连接酶——“分子缝合针”（1）分类：一类是从大肠杆菌中分离得到的，称为DNA 连接酶
DNA 连接酶只能将 连接起来，不能将双链DNA 片段平口末端之间进行连接；另一类是从 T4噬菌体分离出来的，称为 T4DNA 连接酶
T4DNA 连接酶既可以“缝合”双链 DNA 片段互补的 ，又可以“缝合”双链 DNA 片段的 ，但连接 之间的效率比较低
（2）DNA 连接酶连接的是 键
3、载体——“分子运输车”（1）载体的作用：将切割下来的 导入受体细胞
（2）作为载体必须具备以下条件：①能够在宿主细胞中复制并稳定地保存；②具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接；③具有某些标记基因，便于进行筛选，如对抗生素的抗性基因
（3）目前通常使用的
